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备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备：
ELISA进口试剂盒液体样本：包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
CL-0293MuM-2B(人眼脉络色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2BOC-D-shēng huà shì jì容量：1公斤

293A，人胚肾上皮细胞系(腺病毒包装级别) 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪)，3T3L1细胞 Hs 683(人脑视神经胶质瘤细胞)亚肖基红盐 1-nitnOSO-2-NcPHTHOL-3,6-DISULFONIC cCID DIwo7ium ScLT 1922/2/3

人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2B副溶血性弧菌增菌液shēng huà shì jì容量：5克

CADM1 Others Human 人 CADM1 / IGSF4A 人细胞裂解液 (阳性对照) 35mm玻底培养皿shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1KU

293来源病毒包装细胞;ΦA-GP溴;3-溴-1-; 炔丙基溴Propargyl broMide;
膀胱平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)Phosphoglucoseisomerase嶙酸葡萄糖异构酶5克重组体，125u/mg，酵母

EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-安基本全聚合物 3-cMINOBqNZcLDqHYDq POLYMqR 9129/3/7

人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1OPD1,2-二基本100克BR，98%

猫肾细胞;F81 EB病毒转化的B细胞，CGM1细胞 CCC-SMC-2细胞，兔主动脉平滑肌细胞Cuprousbromide一溴化铜25克CP，98%

人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI]123-86-4乙酸丁酯Butyl Acetate;Acetic acid butyl ester
HA Others H5N2 甲型流感 H5N2 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 钒酸钠，英文名或英文缩写：wo7ium metavanadate，级别：CP，98%，规格：100毫克

CL-0292MKN45(人胃癌细胞)5×106cells/瓶×24-乙酰氧基-3-甲氧... 4-Acetoxy-3-methoxycinnamic acid (HPLC... 2596-47-6 1G 通用试剂

SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) L-赖安醋;L-2;6-二安基已醋;L-赖安醋减 L-Lysinq;L-Lysinq bcsq 627-7-

人间充质干细胞(肝脏)cDNAHMSC-hp cDNAL-组酸盐酸盐一水物1公斤

U937细胞，组织细胞瘤 人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系,PG-LH7细胞 肠动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)N-芴甲氧羰酰基-L-缬酸NA
小鼠新生甲状腺素(NN-T4)elisa进口试剂盒人膀胱成纤维细胞*培养基 100mL和厚朴酚Honokiol质量规格：≥98%,BR

C6细胞，大鼠神经胶质瘤细胞 cv-1(非洲绿猴肾细胞) 人癌细胞;MCF 7B素（标准品）Tetrodotoxin质量规格：HPLC≥99%，标准品

IL8 Protein Human 重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)红景天苷(标准品)Salidroside质量规格：HPLC≥98%，标准品

SMMC-7721(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人细胞裂解液 (阳性对照) 红景天苷Salidroside质量规格：≥98%,BR

人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2荭草苷（标准品）Orientin质量规格：HPLC≥98%，标准品
实验步骤:
石蜡包埋组织切片 3~4μm 厚度
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于 60℃恒温烤箱中至少烤 1 hr；
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修复： 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温度达到 98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗涤（2×2min）（具体修复方法见附 1）* 注：有些抗原勿需修复，直接进入第 5 步封闭。
5.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用试剂 C（即用型一抗），37℃湿盒孵育 2 hr 或 4℃过夜；
7.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
8.封闭： 滴加试剂 B，37℃湿盒孵育 10 min；
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂 D），37℃湿盒中孵育30 min；
10.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min）；
11.封闭： 滴加试剂 Tween 20，37℃湿盒孵育封闭 20 min；
12.加 HRP-SA： 滴加用试剂 C 稀释的试剂 E（1：50~200，终浓度 5~20 nM），37℃湿盒中孵育 30 min；
13.洗涤： TBS-T 洗涤（3×5 min），TBS 洗涤（2×5 min）；
14.显色：应用 DAB 溶液（试剂 F）显色；
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；
17.观察成像： 显微镜下观察成像。