购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的产品名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。产品仅用于科研

培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 bFGF-9 小鼠碱性成纤维细胞生长因子9 规格： 48T/96T

 bFGF-6 小鼠碱性成纤维细胞生长因子6 规格： 48T/96T

 bFGF-4 小鼠碱性成纤维细胞生长因子4 规格： 48T/96T

 bFGF 小鼠碱性成纤维细胞生长因子 规格： 48T/96T

 TAb 小鼠甲状腺素抗体 规格： 48T/96T

 T4 小鼠甲状腺素 规格： 48T/96T

 TG 小鼠甲状腺球蛋白 规格： 48T/96T

 TPO 小鼠甲状腺过氧化物酶 规格： 48T/96T

 PTHrP 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白 规格： 48T/96T

 PTH 小鼠甲状旁腺激素 规格： 48T/96T

 AFP 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白 规格： 48T/96T

 Methylase 小鼠甲基化酶 规格： 48T/96T

 SDF-1β/CXCL12 小鼠基质细胞衍生因子1β 规格： 48T/96T

 SDF-1a/CXCL12 小鼠基质细胞衍生因子1a 规格： 48T/96T

 TIMP-4 小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4 规格：

2-氯-6-羟基* 38025-90-0

4-氨基四氢吡喃 38041-19-9

二氟乙酸 381-73-7

3-氯-2-氰基吡啶 38180-46-0

2-氯-5-氟* 38186-88-8

*0 电击感受态细胞 50ul*52-氨基-5-溴* 38191-34-3

5-溴-2-羟基嘧啶 38353-06-9

三氟乙酸乙酯 383-63-1

3-氯-2,4-二氟硝基苯 3847-58-3

2-肟氰乙酸乙酯 3849-21-6

2,6-二氯* 38496-18-3

2,6-二氟苯甲酸 385-00-2

3-氟-2-硝基* 385-01-3

2-氟-6-硝基苯甲酸 385-02-4

2-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶 38533-61-8

2,3-二氟溴苯 38573-88-5

1,3-环戊二酮 3859-41-4

2,3,4-三氟苯胺 3862-73-5

3,4-二氟苯胺 3863-11-4

6-三氟甲基吡啶-3-醛 386704-12-7

喹啉-8-甲醛 38707-70-9

4-氟吲哚 387-43-9

7-氟吲哚 387-44-0

48T/96T

注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。