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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

 AMA 大鼠抗心肌抗体 规格： 48T/96T

 dsDNA 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 规格： 48T/96T

 dsDNA 大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体 规格： 48T/96T

 ASMA 大鼠抗平滑肌抗体 规格： 48T/96T

 ATR 大鼠抗*受体 规格： 48T/96T

 AT-Ⅲ 大鼠抗*Ⅲ抗体 规格： 48T/96T

 AECA 大鼠抗内皮细胞抗体 规格： 48T/96T

 TRACP-5b 大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b 规格： 48T/96T

 AsAb 大鼠抗精抗体 规格： 48T/96T

 ATGA/TGAB 大鼠抗甲状腺球蛋白抗体 规格： 48T/96T

 TPO-Ab 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体 规格： 48T/96T

 TPO-Ab 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体 规格： 48T/96T

 EMA IgA 大鼠抗肌内膜抗体IgA 规格： 48T/96T

 gp210 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体 规格： 48T/96T

 AMA 大鼠抗单核细胞抗体 规格： 48T/96T

 TRAb 大鼠抗促甲状腺素受体抗体 规格： 48T/96T

 αFodrin IgG/IgA 大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA 规格： 48T/96T

大鼠抗IVIgG抗体ELISA Kit，48T/96T 大鼠抗IVIgG抗体ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

大鼠抗IgE受体抗体ELISA Kit，48T/96T 大鼠抗IgE受体抗体ELISA Kit，48T/96T 规格： 48T/96T

 MIF 大鼠巨噬细胞移动抑制因子 规格： 48T/96T

 MIP-5 大鼠巨噬细胞炎症蛋白5 规格： 48

4-氯吡咯并嘧啶 3680-69-1

3-溴丙基甲基醚 36865-41-5

3,4-二胺基苄氧基三氟化物 368-71-8

间三氟甲基苯腈 368-77-4

3,4-二氟硝基苯 369-34-6

3-溴-4-氯吡啶 36953-42-1

*0F`感受态细胞 100ul*104-氟茴香硫醚 371-15-3

5-溴嘧啶-2-羧酸 37131-87-6

4-氟苯胺 371-40-4

4-氟* 371-41-5

对氟苯硫酚 371-42-6

2-氟乙醇 371-62-0

氰乙酸 372-09-8

T/96T

注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。