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培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
操作方法：
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。

shēng huà shì jì 卵黄钠琼脂培养基 容量： 250克

shēng huà shì jì 卵黄高盐琼脂基础 容量： 100克

shēng huà shì jì 卵黄*溶液 容量： 1米

shēng huà shì jì 卵白素（鸡蛋） 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氯亚铂酸钾 容量： 1克

shēng huà shì jì 氯 容量： 5克

shēng huà shì jì 氯甲基树脂 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氯化银 容量： 25克

shēng huà shì jì 氯化铟 容量： 25克

shēng huà shì jì 氯化乙酰* 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化亚锡 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化亚铜 容量： 100毫克

shēng huà shì jì 氯化亚铁 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化亚汞 容量： 5克

shēng huà shì jì 氯化血红素 容量： 1克

shēng huà shì jì 氯化锌 容量： 25克

shēng huà shì jì 氯化硝基四氮唑蓝 容量： 2～8°C 1克

shēng huà shì jì 氯化锶 容量： 2～8℃ 100毫克

shēng huà shì jì 氯化铈 容量： 100克

shēng huà shì jì 氯化十六烷基吡啶 容量： 2～8℃ 2毫克 

shēng huà shì jì 氯化铯 容量： 500u

 α-GST 人α*S转移酶 规格： 48T/96T

 α Manase 人α甘露糖苷酶 规格： 48T/96T

 IFN-α 人α干扰素 规格： 48T/96T

 ACTN-3 人α-辅肌动蛋白3 规格： 48T/96T

 BJ5183-AD-1 电击感受态细胞 50ul*5Gal 人α半乳糖基抗体 规格： 48T/96T

 αGAL 人α半乳糖苷酶 规格： 48T/96T

 αNAG 人αN已酰氨基葡糖苷酶 规格： 48T/96T

 AFU 人αL岩藻糖苷酶 规格： 48T/96T

 IDUA 人αL艾杜糖苷酸酶 规格： 48T/96T

 α2-PI 人α2纤溶酶抑制物 规格： 48T/96T

 α2-AP 人α2抗纤溶酶 规格： 48T/96T

 α2-MG 人α2巨球蛋白 规格： 48T/96T

 AMBP 人α1微球蛋白/bikunin前体 规格： 48T/96T

 α1-MG 人α1微球蛋白 规格： 48T/96T

 α1-AGP 人α1酸性糖蛋白 规格： 48T/96T

 AACT 人α1抗胰* 规格： 48T/96T

 IFN-α/βR 人α/β干扰素受体 规格： 48T/96T

 XCR1 人XC趋化因子受体1 规格： 48T/96T

 TCR 人T细胞受体 规格： 48T/96T

 TCGF-Ⅲ 人T细胞生长因子-Ⅲ 规格： 48T/96T

 LAT 人T细胞活化连接蛋白 规格： 48T/96T

 TU3A 人TU3A蛋白 规格： 48T/96T

 TLR-9/CD289 人Toll样受体9 规格： 48T/96T

 THP 人TH糖蛋白 规格： 48T/96T

注意事项:
1. 产品仅用于科研感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少Z终用于涂板的菌量。
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA（根据实际情况加入适量的DNA，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒DNA所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
 5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。