参数规格：
产品名称：无乳链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒
产品货号：YS-P013407

产品规格：50次

产品分类：PCR检测试剂盒

产品运输：低温运输

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。

实验过程：

一、试剂准备

1. DNA模板

2．公司产品仅用于科研对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）

3．10×PCR Buffer

4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5．Taq酶

二、操作步骤

1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1（10pM）               2μl

引物2（10PM）              2μl

Taq酶（2U/μl）            1μl

DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl

加ddH2O至               50 μl

视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。

2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。

3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：

1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。

2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。

3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。

4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。

5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。

6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

小鼠钙结合蛋白S100A11(S100A11) 甲霜灵（标准品）4号染色体开放阅读框51抗体

小鼠钙结合蛋白S100A7(S100A7) 磷标准溶液（100μg/ml,u=4%）分支酶GBE1抗体

小鼠S100钙结合蛋白B (S100B) 磷标准溶液（1.00mg/ml,基体：甲）磷酸化丝切蛋白抗体

小鼠钙结合蛋白S100A6(S100A6) 甲氧滴滴涕（标准品）补体成分5受体1抗体

小鼠S100钙结合蛋白A12(S100A12 )甲氧隆（标准品）分裂周期2样蛋白激酶6抗体

小鼠山梨脱氢酶(SDH)灭草隆（标准品）补体C3IP1抗体

小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)灭多威（标准品）磷酸化周期检测点激酶2抗体

小鼠促胰液素(SCT)烟嘧磺隆（标准品）周期素依赖性激酶11抗体

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)戊硫（标准品）周期素依赖性激酶10

小鼠硒蛋白P(SEPP1)甲酸铵（色谱级）8号染色体开放阅读框86抗体

小鼠脑信号素7A(SEMA7A)Amberlite IR-120阳离子交换树脂（钠型）磷酸化分裂周期蛋白25B抗体

小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK) 乙酸戊酯（标准品）磷酸化分裂周期蛋白25B抗体

小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)烯酸（HPAA）（标准品）磷酸化半胱酸蛋白酶蛋白6抗体

小鼠Sestrin 1蛋白 (SESN1) 苯乙酮（标准品）9号染色体开放阅读框172抗体

小鼠Sestrin 2蛋白 (SESN2) 苯甲（标准品）磷酸化P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂

小鼠Sestrin 3蛋白 (SESN3) 氯烯（标准品）表面趋化因子受体4相关蛋白2抗体
无乳链球菌染料法荧光定量PCR试剂盒phospho-IKK beta (Tyr466)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体桑色素 分析标准品，≥98

phospho-IKK beta (Tyr199)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体2-甲基-3-三氟 99%

phospho-IKK gamma (Ser85)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体三酚  ≥99.0% (HPLC)

phospho-IKK gamma (Ser31)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体三酚标准溶液 1000μg/ml，溶剂：甲

phospho-IKK gamma (Ser376)  磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体酚 植物培养级，>99.0% (HPLC)

IKI3 family protein  拟南芥IKI3抗体,二水 99%

IL-9  白介素9抗体苯酸 97%

IL-10  白介素-10抗体罗丹明6G Biological stain
使用方法：

一、样品采集：

1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。

2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。

3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。

4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。

一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）

1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。

4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用

6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。

7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。