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50次 非洲马瘟病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

具体成交价以合同协议为准

2021-11-19上海市
型号
50次
参数
品牌:其他品牌 规格:50次 货号:YS-P013366 品牌:YSRIBIO
上海研生实业有限公司

初级会员9经销商

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PCR检测试剂盒、PCR试剂盒, 核酸检测试剂盒,荧光定量检测试剂盒,生化试剂盒 ,比色法试剂盒,酶活性检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫检测试剂盒,试剂盒,ELISA试剂盒,抗体,重组蛋白,分光光度法检测试剂盒,细胞株,原代细胞,细胞培养基,标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司公司产品。
产品简介
非洲马瘟病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
详细信息

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

5、 检测稀释液B:1×10ml。
服务流程:

公司产品仅用于科研接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

规格

货号

非洲马瘟病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒

50次

YS-P013366

PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

94℃

5   min

1

变性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

终延伸

72℃

5   min

1

 

QQ截图20191211135002.jpg 

PCR反应的特异性决定因素为:

①引物与模板DNA特异正确的结合;

②碱基配对原则;

③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

④靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

小鼠胆固酯转移蛋白(CETP)3-苯酸(>98%,BR)几丁质酶结构域蛋白1抗体

小鼠胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG) 叔丁基-4-羟基苯甲(>98%,BR)嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗体

小鼠生长停滞特异性蛋白6(Gas6)4,4'-联吡啶(>98%,BR)几丁质酶1抗体

小鼠硫酸软骨素(CS)4,4-二羟基二苯砜(>98%,BR)白抗原CD97 alpha 抗体

小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)4,5-二氯荧光素(>98%,BR)紧密连接蛋白2抗体

小鼠染色盒同源物3(CBX3)4-溴异喹啉(>98%,BR)紧密连接蛋白7抗体

小鼠染色质区解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)对溴苯氧乙酸(>95%,Ind Grade)2号染色体开放阅读框53抗体

小鼠染色质区解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)对基苯甲酸(>98%,BR)2号染色体开放阅读框54抗体

小鼠睫状神经营养因子(CNTF) 对乙氧基苯甲(>98%,BR)2号染色体开放阅读框56抗体

小鼠顺铂耐性相关过表达蛋白(CROP)4-羟基(>98%,BR)2号染色体开放阅读框61抗体

小鼠C-jun  4-苯甲酸(>98%,BR)癌相关抗原抗体

小鼠克拉拉蛋白(CC17)对甲苯(>98.5%,BR)分裂周期相关蛋白4抗体

小鼠白分化抗原3(CD3)对甲氧基苯乙酮(>98%,BR)色素b5抗体

小鼠白分化抗原4(CD4)4-甲氧基酚(>98%,BR)钙粘蛋白相关的神经受体2抗体

小鼠白分化抗原19(CD19)对甲基肉桂酸(>98%,BR)1号染色体开放阅读框186抗体

小鼠白分化抗原30(CD30)4-甲基伞形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)CXC趋化因子16抗体
非洲马瘟病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒GDF8  羊抗生长分化因子8/肌肉抑制素抗体2,5-二氯噻吩 98%

GDF-9  生长分化因子9抗体3,4-二甲氧基噻吩 97%

GDNF  胶质源性神经营养因子抗体3-甲氧基噻吩 98%

Gelsolin  凝溶胶蛋白抗体2-甲氧基噻吩 99%

GFAP  胶质纤维酸性蛋白抗体2-硝基噻吩 98%

GFP  绿色荧光蛋白(免疫组化用抗体)四溴噻吩 99%

GFP  绿色荧光蛋白抗体噻吩-2,3-二甲 98%

GFP  绿色荧光蛋白抗体盐酸胍 分子生物学级,99.5%


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产品参数

品牌 其他品牌
规格 50次
货号 YS-P013366
品牌 YSRIBIO
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