细胞传代技术实验原理:
当培养的细胞增殖达到一定密度后,将会出现密度抑制现象,表现为细胞的生长和分裂速度逐渐减慢,甚至停止。贴壁细胞会在培养瓶中长成致密单层 (悬浮细胞会充满整个体积的培养液),铺满培养瓶底部,此时如果不及时进行分装再培养,即传代培养,细胞将逐渐走向衰老、死亡,将培养的细胞从一个容器以适当比率转移到其他容器中扩大培养,称为传代培养。
首先,我们需要准备好相应的实验器材:装有75%医用消毒酒精的酒精喷壶、PBS缓冲液、yi酶、含血清培养基、巴氏吸管、移液器、离心管、废液缸。至于其他的超净台、培养箱、离心机等都是一个细胞间的基础设施。
然后,我们需要把我们准备的器材放入超净台,打开紫外照射灭菌,值得注意的是若是培养的细胞对温度比较敏感,可以将含血清的培养基瓶子(包括盛放yi酶的瓶子)放入37℃的水浴箱使得培养基温度在37℃,再转移到超净台紫外灭菌,当然一般的细胞对培养基的温度不是很敏感,不用对培养基加温也是可以的。另外,细胞培养间也需要紫外照射半小时左右。