IHC是指免疫组织化学,是许多实验室里都会运用到的主要免疫测定方法,用来证明重要蛋白质是否存在,检测翻译后修饰,诊断疾病等等。IHC利用免疫学和生化技术并通过与目标抗原相互作用的标记抗体来检查不同的组织切片。抗体抗原相互作用的可视化可以使用可见标记或者染色剂体现出来。IHC具有可视化细胞的独te细胞成分的作用,广泛被病理学家和诊断人员使用。我们在进行IHC实验前一般都要制备样品,那么怎样制备IHC样品呢?
样品制备如下:
1.在室温环境下用2%多聚甲醛将新鲜解剖的组织(<3mm厚) 1小时或过夜固定。
2.冲洗组织:使用流动的自来水冲洗5min。
3.用70%,80%,95%的酒精分别使组织脱水,时间每次为5分钟,然后用100%的酒精进行3次脱水,每次时间为5分钟。
4.用二甲苯清洗组织2次,每次时间为5分钟。
5.将组织浸泡在石蜡中3次,每次时间为5分钟。
6.将组织包埋在石蜡块中(可以在室温下保存多年)。
7.在切片机上将石蜡包埋的组织块切成5-8μm的厚度并漂浮在含有蒸馏水的40°C水浴中。
8.将切片转移到适合免疫组织化学的载玻片上。
9.切片后在65℃的温度下烘干6小时。
以上就是关于怎样制备IHC样品的全部内容,想要了解更多请联系百奥创新客服为您解答~