美国伯乐CFX96是一款中荧光定量PCR, 越来越多的被国内使用者们采用, 下面是这台机器的中文手册, 可以打印出来放在机器边上方便学生使用。
CFX96 实时荧光定量PCR仪器的操作流程及注意事项
1、开始运行仪器
1.1打开电脑
1.2打开定量PCR仪底座开关
1.3启动CFX Manager软件
2、放置样品
2.1将PCR反应体系加入到0.2ml底缘八联管,盖上管盖;或加入底缘96孔板,用光学级封膜封好。
注意,必须戴一次性塑料手套,不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。
3、设置程序,运行试验
3.1定量PCR软件操作基本步骤为:
a.设置热循环程序文件
(protocol tab)
b.设置反应板文件(plate tab)。
c.点击"start run"键,运行程序。
3.2热循环程序文件(protocol tab)设置指南:点击edit(编辑)或create new(创建新程序)
3.3反应板设置文件(plate tab)设置指南:选择本次试验所需要使用的荧光染料种类;单机样品类型;如要某些反应孔*荧光染料对应的样品类型为标准品(standard),点击‘dilution series’键可设置其标准品浓度及稀释倍数。
3.4点击‘start run’键。单击open lid(打开热盖)或close lid(关闭热盖)放置样品;单击start run,保存文件,开始运行程序。
4、结果分析
4.1PCR反应结束后,软件会自动计算标准曲线和CT值等。
4.2如需进行表达量分析、等位基因分析等,在软件窗口选择相应分析功能。
4.3点击右上方的“Report”键,还可输出结果报告单。
5、关闭运行仪器
5.1实验结束后取出反应管,顺序关闭CFX Manager软件、定量PCR仪电源,关闭电脑。
注意!CFX仪器上盖部分为全自动控制,在通电状态,严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为,此类行为会导致上盖故障,危及仪器使用