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显微课堂:选择合适的荧光滤光片

来源: 上海倍莱德仪器有限公司

2024/12/24 8:07:59 11

选择合适的荧光滤光片是确保生物医学和生命科学仪器中荧光检验分析系统性能的关键步骤。以下是根据参考文章提供的信息,关于如何选择合适的荧光滤光片的详细指南:

  1. 理解荧光滤光片的基本结构和功能

    • 荧光滤光片通常包含三片组合:激发滤光片、发射滤光片和二色镜。

    • 激发滤光片负责筛选合适激发光波长,如将白光激发光筛选为蓝光,用于激发GFP等荧光素。

    • 发射滤光片负责筛选需要的荧光发射光,并过滤掉不需要的杂散光、瑞利光和杂质所发射的荧光。

    • 二色镜用于区分激发光和发射光,是荧光滤光片组合中的关键元件。

  2. 根据荧光素的光谱特性选择滤光片

    • 确定所使用的荧光素的激发和发射光谱,这可以通过查询常用的荧光光谱查看器或荧光素供应商的网站来获取。

    • 选择与荧光素光谱匹配的滤光片,确保滤光片的光谱范围能够覆盖荧光素的激发和发射波长。

  3. 考虑光源的光谱特性

    • 根据所使用的激光光源或照明系统的光谱特性,选择滤光片时避免选择光源发射较弱的区域,以确保足够的激发光强度和荧光信号。

  4. 注意滤光片的截止深度和自发荧光

    • 选择截止深度深、自发荧光小的滤光片,以提高荧光成像的信噪比和清晰度。

    • 较好的荧光滤光片采用单片无色透明的玻璃作为基底,在玻璃的两个表面镀膜,这种单片式荧光滤光片在荧光成像上有明显优势。

  5. 考虑滤光片的透射面形和成本

    • 选择透射面形好的滤光片,有利于荧光成像的提取。

    • 单片式荧光滤光片的制作难度较高,成本也相应较高,因此需要根据预算和性能需求进行权衡。

  6. 参考特定应用领域的建议

    • 对于针对某种特征领域的特种荧光物质,需要根据使用场合、环境因素、光源以及荧光物质的荧光光谱来综合确定滤光片的选择。

综上所述,选择合适的荧光滤光片需要综合考虑荧光素的光谱特性、光源的光谱特性、滤光片的截止深度、自发荧光、透射面形和成本等因素。通过仔细比较不同滤光片的性能参数和价格,结合具体应用场景的需求,可以选出的荧光滤光片。


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