1、 标准品
(1) 从试剂盒中取出一支标准品，于6000-10000rpm 离心30 秒。用1ml 样本稀释液溶解，并用吸头对准冻存管底部反复吸打5 次以助溶解，充分混匀得到标准品S7，放置备用。
(2) 取7 个1.5 ml 离心管(S0-S6)依次排列，各加入250μl 样本稀释液。吸取250μl 标准品S7 到*个离心管中(S6)，轻轻吹打混匀。从S6 中吸取250μl 到第二个EP 管中(S5)，轻轻吹打混匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。S0 为样本稀释液。
2、 洗液工作液浓洗涤液按1:25倍用去离子水进行稀释。例如用量筒量取240ml去离子水，倒入烧杯或其他洁净容器中，再量取10ml浓洗涤液，均匀加入，搅拌混匀，在临用前配妥。浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3、 生wu素标记抗体工作液生wu素标记抗体液按1:100倍用生wu素标记抗体稀释液进行稀释。如10μl生wu素标记抗体加990μl生wu素标记抗体稀释液，轻轻混匀，在临用10分钟内配妥。
4、 辣根过氧化物酶标记亲和素工作液辣根过氧化物酶标记亲和素按1:100倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液，轻轻混匀，在临用10分钟内配妥。
操作注意事项:
1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8． 加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
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