双光束紫外可见分光光度计主要用于测量样品溶液的吸光度或透射率。它的工作原理基于比尔-朗伯定律,即溶液的吸光度与溶液中溶质的浓度成正比,其特点是具有两个独立的光路,一个用于参考光束,另一个用于样品光束。这种设计可以有效地消除光源强度波动、探测器响应变化等因素的影响,提高测量的准确性和稳定性。
主要组成部分包括光源、单色器、样品室、探测器和显示器。光源通常采用氘灯(紫外区)和钨灯(可见区),可以提供连续的光谱。单色器用于从光源发出的宽带光谱中选择特定波长的光,通常采用光栅或棱镜作为分散元件。样品室用于放置待测样品,通常采用石英或玻璃制成,以保证在紫外和可见区域的透光性。探测器用于检测通过样品后的光强,常用的有光电二极管、光电倍增管等。显示器用于显示测量结果,可以是数字显示屏或计算机屏幕。
双光束紫外可见分光光度计的工作原理如下:
1.光源发出的宽带光谱经过单色器后,选择出特定波长的光。这个特定波长的光被分为两束,一束作为参考光束,另一束作为样品光束。
2.参考光束直接照射到探测器上,探测器将光强信号转换为电信号,并传输给显示器。显示器记录下参考光束的光强值,作为后续计算的基准。
3.样品光束照射到样品室中的样品溶液上,部分光被样品吸收,部分光透过样品。透过样品的光照射到探测器上,探测器将光强信号转换为电信号,并传输给显示器。显示器记录下样品光束的光强值。
4.显示器根据比尔-朗伯定律,计算出样品溶液的吸光度或透射率。具体计算公式为:吸光度A=log(I0/I),其中I0为参考光束的光强值,I为样品光束的光强值。透射率T=(I/I0)×100%,表示样品对光的透过程度。
5.通过改变单色器的设置,可以选择不同的波长进行测量,从而得到样品溶液在不同波长下的吸光度或透射率曲线。这些曲线可以用于分析样品的成分、浓度等信息。