所谓保留时间锁定,就是使特定化合物的保留时间在不同仪器、不同色谱柱(但标称固定相和相比相同)之间保持不变。
一、概述
决定保留时间的因素如下:
1、化合物的性质、固定液的性质。
2、操作条件。即载气流速、柱温、毛细管柱规格和检测器类型等。
二、详细说明
1、载气控制
对于同种载气来说,压力和流速是影响保留时间的参数;
不同厂家的压力表和流量计的制造精度有所不同,故当不同仪器的压力和流量显示*一致时,柱内流量也不尽相同;
现在有了EPC,这一问题基本得到了解决;虽然同一厂家制造的EPC不可能每项都严格一致,但差异微小,通过压力的自动调节*可以补偿这一差异。
2、温度控制
保留时间对温度极为敏感,过去采用水银温度计测量柱温时,重现性显然有问题。现在都用热敏元件与电子线路来控制温度,精度大为提高。不同仪器间温度重现性令人满意。即使有0.5℃的温度差异,我们仍能通过调节柱前压的办法来使保留时间达到重现。
3、色谱柱规格
不同厂商的色谱柱,尽管标称规格一致,但难免有内径的不均匀、固定液膜厚的变化、以及柱长的不,这些都会造成保留时间的波动。
同一根色谱柱在使用过程中会发生变化,比如重新安装或因柱污染而截去1~2cm后,若其他操作条件不变,保留时间就不能重现了。
目前,同一厂商的色谱柱制造重现性已相当高,而不同厂家的色谱柱尚不能*重现,尤其是极性柱。但我们如果采用同一厂家的色谱柱,就可基本解决这一问题。至于色谱柱长度的变化,可以通过调节柱前压来补偿。
4、检测器类型
常规检测器:常压下工作;
MS:高真空下工作;
AED:高于大气压(如,10kPa)下工作。
这样,当比较常规检测器和MS或AED所得结果时,即使柱前压严格一致,柱压降也不同,保留时间就不能重现。采用EPC时,就很容易通过调节压力使柱压降保持相同。
三、小结
通过上述分析我们可以得出结论,只要仪器的载气和温度控制精度足够高,只要色谱柱标称规格一致,就可以通过调节柱前压的方法来补偿操作参数的微小变化,从而实现保留时间的重现,这就是RTL的基础。
(文章来源衡天力仪器网)