1、色谱柱的柱效和保护柱
拿到一根新柱时,一定要先看其使用说明,然后测柱效,定期检测柱效,保留在新色谱柱上得到的色谱图,并记录条件,定期检测仪器的谱带展宽,若应用于在线监测,应对色谱柱提供在线的物理保护和化学保护,例如采取安装在线过滤器,自装填料保护柱和预装保护柱等。在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计,优点是基本不影响柱效,在需要高柱效的时候常用,常更换的消耗品是滤芯和垫圈。
保护柱的作用是防止柱子被化学污染,缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效,特别是在用微柱时,常用的是普通自装填料的保护柱。zui近新出的一些保护柱例如Sentry-guard保护柱,它的特点是高质量、填料、增加分析柱效、对脏样品载荷能力大,能延长保护柱的寿命,手可拧紧接头,安装时不需要工具,省时省,可换芯式设计,能采用各种不同的填料,主要适用于非常脏非常复杂的样品本底,例如,生化样品,环境样品和食品等,或者不想做太多的固相萃取,不想降低柱效果等情况。
2、色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解,用对该样品洗脱能力zui强的流动相清洗,对于硅胶柱,先用甲醇洗去极性杂质,然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100-200mL 依次活化,对于键和相柱,一般用甲醇-氯方-甲醇-水依次冲洗, 每种色谱柱有特定的清洗方法, 一定要看其使用说明。
3、色谱柱的存放
存放前除去杂质和盐,采用合适的存放溶剂,避免色谱柱床的干枯,避免机械振动,防止细菌生长,注意存放的温度。