抗原特异性反的过柱方法及具体过程分析
时间:2022-04-23 阅读:45
抗原特异性反应为基础,含有和赭曲霉毒素抗体结合在一起的凝胶。上样时,经提取、过滤、稀释后的样品缓慢地通过赭曲霉免疫亲和层析柱,在柱内赭曲霉毒素与抗体结合,其他物质不会结合而直接流出。此后洗涤免疫亲和柱,*除去未结合的其他物质。加入甲醇,将赭曲霉毒素释放并洗脱,再注入到分析仪器中进行检测。
济南免疫亲和柱的过柱方法:
使用前,将免疫亲和层析柱回至室温(22-25℃),放空里面的溶液。
上样:将处理好的样品液,以1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱,弃掉流出的液体。
淋洗方法1:加20水淋洗柱子,弃掉流出的液体,真空抽干。
淋洗方法2:加20mLPBS淋洗柱子,弃掉流出的液体,真空抽干。
淋洗方法3:先加10mL水,再加10mLPBS淋洗柱子,弃掉流出的液体,真空抽干。
淋洗方法4:先加10mLPBS,再加10mL水淋洗柱子,弃掉流出的液体,真空抽干。
洗脱:加入2mL甲醇缓慢洗脱,流速约为2-3秒每滴,真空抽干,收集全部洗脱液45℃以下氮吹干,加1mL流动相复溶,上机检测。