原理：

　　测定的基础是抗原抗体反应，抗体连接在柱体内，样品经过提取、稀释后，缓慢的通过三合一免疫亲和柱，在免疫亲和柱内抗体与样本中的雌酚类结合，之后洗涤免疫亲和柱去除没有被结合的杂质。然后用洗脱液洗脱雌酚类，洗脱产物用合适的分析仪器进行检测。

　　济南免疫亲和柱使用注意事项：

　　1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高；

　　2、若样品为复杂样品，例如高蛋白、高油脂、酸性样品，可以将提取液分两次提取样品，可以提高提取效果；

　　3、样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀，约每秒1-2滴；

　　4、抗原抗体发生反应的较佳温度是在25℃左右，实验需要的环境温度较好是室温24℃-28℃，太高或太低的温度都会对亲和柱的回收率有一定的影响。在使用前需要恢复至室温再进行实验；

　　5、不要在无水状态下，琼脂容易干燥，影响亲和柱的质量；

　　6、亲和柱储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温，因为缓冲液冻结，会严重影响亲和柱内的物理结构，对亲和柱的质量影响很大；

　　7、洗脱一般选择试剂甲醇，为增强洗脱效果可加大甲醇体积；

　　8、样液免疫亲和柱净化后，洗脱液过0.45um或更小孔径滤膜效果更好。