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产品名称:PEI瞬时转染试剂
产品简介:
PEI瞬时转染试剂(PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine):PEI Prime是以一种阳离子高分子聚合物-聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)为载体的基因转染试剂。PEI是在pH中性溶液中具有*正电荷密度的合成聚合物。带正电的PEI与带负电的DNA牢固结合,并赋予净阳离子电荷,使DNA进入细胞。PEI Prime是一种高性能转染试剂,利用PEI的特性旨在实现高产量,可重复性和可扩展的瞬时基因表达。
应用范围:
PEI转染试剂能够高效率转染多种细胞系,包括贴壁细胞和悬浮细胞。此外,PEI是用于HEK293和CHO悬浮细胞转染的试剂。PEI转染试剂是生产任何具有成本效益的生物制剂的合适选择,包括重组蛋白,抗体和病毒。
PEI瞬时转染试剂产品优势:
1. 低毒,高效
2. 操作简单,高性价比
3. 可提供可靠、具有可重复性的转染结果
4. 适用于快速、高通量转染流程
转染步骤:
-以HEK293贴壁细胞为例,步骤如下:
1. 细胞接种:细胞密度2-6 x106 cells/mL。
2. 质粒的准备:在5%最终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释1.0 ug pDNA。
3. PEI的准备:在5%最终培养体积的DMEM或培养基中,每106个细胞稀释3.0 ug PEI Prime,混匀。
4. 通过快速,短暂涡旋或颠倒数次试管,将pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。
5. 使pDNA和PEI的混合物在室温下静置10分钟。
6. 一边旋转板,一边将pDNA和PEI混合物逐渐滴加到细胞中。
7. 于37℃ CO2培养箱中培养。
转染的优化:
为达到高转染效率和低细胞毒性的理想结果,可以进行如下优化:
参数 | 范围 |
PEI浓度 | 3.50-6.50mg/(L final culture) |
DNA浓度 | 0.75-1.5mg/(L final culture) |
PEI/DNA混匀时间 | 5.0-15.0minutes |
与市场同类品牌的PEI转染效率的对比:
使用PEI Prime(PEI:DNA浓度比3:1)或某国外品牌PEI,用CMV-SEAP质粒转染20ml 含HEK293悬浮细胞的培养物。 转染后5天,使用磷酸酶报告染料和UV / Vis检测SEAP表达水平。数据表示占某国外品牌PEI的SEAP表达水平的百分比。结果显示我们的PEI Prime 的转染效率比国外同类厂家高出40%。