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TaqMan探针法基因分型

时间:2019-03-14      阅读:1523

TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增检测的方法,通常用于少量SNP位点的分析,核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。 
探针的5’-端和3’-端分别标记一个荧光报告基团(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一个荧光淬灭基团(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。当荧光探针保持完整时,5′-端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭,仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号。 
PCR扩增时,加入一对特异引物的同时,加入一对特异性的荧光探针,该探针只与模板特异性地结合,其结合位点在两条引物之间。当溶液中存在DNA目的片段时,荧光探针与模板退火结合,随着PCR的进行,热启动Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针,其5′-3′外切酶活性(此活性是双链特异性的,游离的单链探针不受影响)就会切割探针,释放5′-端报告基团游离于反应体系中,远离3′-端荧光淬灭基团的屏蔽,破坏两荧光分子基团间的能量转移(FRET),因此5′-端报告基团受激发所发射的荧光信号就可以被探头检测到。每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号累积与PCR产物形成的同步,荧光信号的强度能够代表模板DNA的拷贝数。 
 
技术原理 
 
结果示例 
 
服务内容 
1、基因和SNP序列信息分析。 
2、实验方案讨论与确定。 
3、引物和探针的设计优化。 
4、引物和探针的合成。 
5、qPCR实验。 
6、数据分析整理。 
7、报告生成。 
服务流程 
1、提交项目课题相关需求和资料。 
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。 
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 
4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。 
5、开展实验,按期完成合同规定的内容。 
6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。 
我们的优势 
1、提供各种实验材料和仪器,满足项目课题实验需要。 
2、专业的操作人员。 
3、高规格实验室。 
4、数据结果交付周期快。 
5、完善的服务体系,全程跟进,确保满意。 
咨询与订购 
感谢您选择我们的服务,如果您有任何问题,请联xi我们,我们将竭诚为您解答和服务。 
 

 

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