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面议仪器组成及性能:
Q Exactive LC-MS/MS系统,属于四级杆-orbitrap串联的高分辨质谱,将高性能四极杆的母离子选择性与Orbitrap的高分辨,高质量精度相结合,具有快速扫描和多重检测能力,不仅具有大范围的筛选能力,而且尤为擅长目标定量实验。其配有ESI源、APCI源和纳喷源三种离子源。
液相系统配有Easy-nLC1000纳流液相色谱和Ultimate 3000HPLC系统。EASY-nLC 1000系统具有在超高压条件下分离生物分子(比如蛋白质和多肽)的*性能。可与质谱系统无缝连接以直接执行安全可靠的检测。更高的操作压力范围(0-1000bar)显著缩短了分析周期,其设计旨在通过加速上样和柱重新平衡的过程提高分析效率。另外,即使面临非常复杂的样品,新系统的不分流纳升级功能也能提供出色的保留时间重复性(RSD小于0.4%)。简明的一体化配置方便而耐用。Ultimate 3000HPLC系统压力可达到9000psi,可以初步适应超高压液相色谱的要求。
母离子选择性;(6)高能HCD裂解产生二级碎片离子; (7) 4-5数量级动态范围;(8)兼容UPLC;(9)每个色谱峰保证至少11-15个数据点:(10)台式,体积小巧。Q Exactive质谱系统配备的S-透镜组件采用步进RF电压,可选择不同的质量范围;质量范围由几个S-lens电压决定;降低了离子注入时间的2-3倍;使得离子传输效率提高了5-10倍。
这款系统的核心价值:具有的定量能力,特异性强,灵敏度高,线性范围较宽,快速正负切换,正负切换定量时仍能保证较高的 分辨率。通过高分辨率测定精确质量数进行化合物定性,超高分辨率 R=140,000(200Da),具有优异的质量稳定性。非常适合于未知物的扫描和定量;不需要搜集很多的标准品就可进行方法优化。具有分辨率更高,质量稳定性更好,复杂基质中分析的灵敏度更高,速度快、能减少前处理等优势,适合食品安全,环境监测,药物研发,各种组学等诸多领域的应用。
相比QQQ的分析方法,Q-Exactive分析已知目标化合物的优点包括:(1)高分辨全扫描定量,无需方法优化;(2)一针分析的目标组分数目没有限制;(3)精确质量数加二级全谱确证;(4)灵敏度=QQQ;(5)线性范围达4-5个数量级。
应用范围:
1.蛋白质组学方面:
a.可结合免疫共沉淀技术对特定蛋白通路中其他可能参与调控的未知蛋白进行推测鉴定。
b.可用于对亚细胞结构或细胞、组织、及血液、尿液等进行蛋白组学的研究,通过与正常样品的对比,寻找并鉴定出差异蛋白,从而推测分析整体蛋白表达水平差异的调控机制。
c.可用于蛋白翻译后修饰的研究,推测蛋白翻译后修饰的种类和位点。
优势:可在单次实验中鉴定更多*的蛋白质,能进行准确的完整蛋白分析,快速定量低丰度等质量标记的肽段。可在各种复杂基质下,完成对有机物高分辨率、高精度的鉴定。
2. 代谢组学方面:
a. 人体代谢物(血液、尿液、唾液或特定组织器官)与正常样本对比的整体差异性代谢水平研究,可用于疾病的早期诊断(肿瘤标志物的筛查)等。
b. 药代动力学研究:对药物代谢过程的ADME环节中的代谢物进行定性和定量分析。
c. 特定代谢途径的调控分析,具有定性未知代谢物和同时精确定量的能力
3. 对药物生产过程中的中间体或杂质进行定性和定量分析。
4. 可对环境或食品中的痕量有机毒素进行定性和定量检测。
5. 可对中药材或中药复方的复杂组分进行快速的定性、定量分析,便于进行质量控制。