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面议高转移潜能肝癌细胞;HCCLM3-GFP-LC3培养冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
迄今为止,公司收录背景资料清晰,细胞活力状态良好的细胞株1420株,其中绝大部分是近年来从美国ATCC和NIH分批引进的细胞种子,少部分来自全国各地细胞研究所,细胞来源可靠,背景资料清晰,代数年轻,活力好。冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
产品名称 | 生长特性 | 货期 |
贴壁生长 | 3-5天 |
细胞名称 高转移潜能肝癌细胞;HCCLM3-GFP-LC3培养
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
高转移潜能肝癌细胞;HCCLM3-GFP-LC3培养复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
高转移潜能肝癌细胞;HCCLM3-GFP-LC3培养操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量*,使*的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去*,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止*作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
Spike Others MERS-CoV 中东呼吸综合征冠状病毒 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S1 Protein (aa 1-725) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CM-H079人心脏微血管内皮细胞*培养基100mL
人角质细胞HHFK
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 人肺腺癌细胞,A549细胞 QG-56(肺扁平上皮癌细胞)
人恶性多发性畸胎瘤细胞;NTERA-2
GFRA1 Others Human 人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胚肺细胞VA13细胞;WI-38 VA13亚系2RA
人前脂肪细胞-内脏RNAHPA-v miRNA5 μg
CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
兔主动脉平滑肌细胞;SMC 白血病细胞,L1210细胞 SH2细胞,小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞
人少突胶质细胞
HA Others H16N3 甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
MN-c, 小鼠皮质神经元
TF Others Sus scrofa (Pig) 野猪 Transferrin / TF 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠雪旺氏细胞*培养基 100mL
UMNSAH/DF-1鸡胚成纤维细胞 UMNSAH/DF-1 chicken embryo fibroblast DMEM培养基+10%FBS
IFNW1 Protein Human 重组人 Interferon omega-1 / IFNω / IFNW1 蛋白 (Fc 标签)
NCI-H209(人小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 MRC-5(胚肺细胞)
胰酪胨大豆羊血琼脂基础250g用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试验
EC肉汤 E.Coli Broth 用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB2008、SN标准)
抗生素5号 Antibiotic No.5 250 用于两性霉素B检定菌种培养
选择性牛心汤*250g/瓶用于链球菌选择性增菌incubationmedia选择性牛心汤*250g/瓶用于链球菌选择性增菌
LST发酵管(含小导管) 10ml*20支/包 每管10ml
葡萄糖酸盐20支绿脓杆菌用
BUFFERED SOD CHLOR PEPTONE incubation media BUFFERED SOD CHLOR PEPTONE
单核增生李斯特菌 食用,药用止血 支/瓶
NutrientAgar
Toxin-ProducingMedium
高转移潜能肝癌细胞;HCCLM3-GFP-LC3培养肉汤培养基I250g用于沙门氏菌选择性增菌培养。
Antibiotic agar GROVE and RANDALL medium 抗生素琼脂1号 1.05272.0500 MERCK默克 incubation media Antibiotic agar GROVE and RANDALL medium 抗生素琼脂1号 1.05272.0500 MERCK默克
Fraser肉汤增菌液(FB1,FB2)基础 250g 用于李斯特氏的选择性增菌培养(SN/T0184.1-2005,ISO标准)。
*琼脂基础NaHCO3AgarBase用于炭疽杆菌的荚膜培养
乳酸杆菌肉汤培养基 250g 用于乳酸杆菌增菌培养
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