戴安液相色谱仪操作及原理
时间：2024-11-29 阅读：121
戴安液相色谱仪是一种高效、精确的分离和分析化合物的设备，广泛应用于生物化学、食品分析、医药研究、环境分析等领域。以下是戴安液相色谱仪的操作步骤及原理的详细介绍：
一、操作步骤
1. 操作前准备
流动相配制：根据所供试品的性质、文献资料或工作经验，按比例配制流动相。并根据流动相的性质选择合适的滤膜（如0.45um的有机膜或水相膜）对流动相进行过滤，然后进行超声脱气10\~15分钟。
样品处理：称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好是流动相或流动相的主成分）进行充分溶解，使其浓度达到0.1\~1mg/mL（可根据检测结果再调节浓度）。并使用合适的滤膜（如0.45um的有机针头滤膜或水相针头滤膜）对样品溶液进行过滤。
色谱柱选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。
2. 开机与仪器设置
打开电源，启动电脑和液相色谱仪工作站软件。
旋开泵上的排液阀，设置流动相的比例及流速，冲洗流路中的气泡。
设置柱温箱温度，清洗进样器。
3. 样品分析
建立仪器方法和处理方法（或调用已有的方法）。
打开检测器（如氘灯），设置波长、采集频率和时间常数，监视基线直至稳定。
样品通过自动进样器注入色谱系统，进行分离和检测。
样品分析结束后，关闭检测器，冲洗色谱柱，并依次关闭泵马达、工作站、检测器、柱温箱、自动进样器等设备的电源。
二、工作原理
戴安液相色谱仪的工作原理基于色谱技术，具体来说：
流动相：携带样品通过色谱柱的介质。在泵的作用下，流动相以稳定的流速连续送入色谱柱系统。
样品进样：样品溶液通过进样器注入色谱柱系统。进样器一般采用定量环或微量注射器，确保进样量的准确性。
色谱柱分离：色谱柱是液相色谱仪的核心部件，由固定相和载体组成。样品在流动相的作用下通过色谱柱，不同组分在色谱柱中的吸附和洗脱能力不同，从而实现分离。
检测器检测：分离后的各组分依次进入检测器，检测器根据各组分的性质将其转化为电信号进行记录。常见的检测器有紫外可见光检测器、荧光检测器等。
数据处理：液相色谱仪配备的数据采集和处理系统可以实时记录各组分的峰形和峰高，并进行积分和归一化处理。通过对比标准品和样品的数据，可以对组分进行定性分析和定量计算。
三、注意事项
在操作过程中，要时刻注意防止溶剂瓶内的流动相被用完，避免空泵运转损坏仪器。
流动相应先脱气以避免产生气泡影响流量稳定性。
溶剂泵的工作压力不能超过规定的最高压力。
长期不用时应用甲醇冲洗各个通道并保持泵的清洁。
色谱柱的保存和使用要遵循一定的规范以避免降低柱效或破坏固定相。
戴安液相色谱仪是一种功能强大且操作相对简便的分析设备。通过了解其操作步骤和工作原理以及注意事项，可以更好地利用该设备进行样品分析和研究。