戴安高效液相色谱仪的正确使用指南可以归纳为以下几个步骤：

　　一、开机前准备

　　1.溶剂和样品处理：

　　使用HPLC前，须采用专用过滤系统对溶剂和样品进行过滤和脱气。所用溶剂等级应为色谱纯，水应为超纯水。

　　密封圈清洗溶液为1:9甲醇/水，每次使用前更换。

　　样品必须经过0.45μm的滤膜过滤，流动相也必须经过0.45μm过滤（色谱纯除外）并脱气。

　　2.检查仪器状态：

　　确保仪器各部件连接紧密，无松动或漏液现象。

　　检查蠕动泵清洗瓶中的甲醇是否充足，如不足需及时更换。

　　二、开机与联机

　　1.开机顺序：

　　按下稳压电源工作电源开关键至“ON”状态。

　　依次接通P680型输液泵、自动进样器（如ASI-100）、柱温箱、检测器（如紫外检测器）、电脑。

　　先运行变色龙工作站，再打开仪器电源，并进行联机。

　　2.仪器初始化：

　　确认各模块的“connected”图标均为绿色，表示仪器与工作站已正确连接。

　　根据需要设置泵的最高压力、低压力和流量。

　　三、仪器设置与平衡

　　1.设置溶剂混合比例和流速：

　　在工作站中设置溶剂混合比例和流速，自动运行高压泵。

　　2.排气泡与清洗：

　　拧松泵右侧的快速清洗阀，按下泵前面板右下方的“Purge”键，排泵内气泡。待气泡排完后，拧紧快速清洗阀。

　　如有需要，可用超纯水清洗进样阀等部件。

　　3.柱平衡：

　　在设定条件下进行柱平衡，时间通常为30~60分钟。

　　4.检测器设置：

　　开启氘灯开关进行预热，10分钟后选择波长。

　　根据需要设置采样频率、波长和波段宽度等参数。

　　四、建立分析方法与序列

　　1.建立程序文件：

　　在工作站中依次点击File/New，选中“Program File”，进入程序编辑向导界面。

　　设置泵的工作方式（如等度分析、二元梯度分析、多元梯度分析等）、流动相通道、高/低压极限和流速等参数。

　　设置自动进样器的参数、通道的选择、采集时间段、紫外信号的具体设置等。

　　浏览程序参数，编辑、修改不适合处，最后单击工具栏中的“保存”按钮保存程序文件。

　　2.建立方法文件：

　　依次点击File/New，选中“Method File”，进入方法编辑向导界面。

　　根据需要设置方法文件的参数，保存方法文件。通常将方法文件和程序文件放在同一个文件夹里。

　　3.建立进样序列：

　　依次点击File/New，选中“Sequence(using Wizard)”，进入序列编辑向导界面。

　　设置样品名称、数量、进样次数、进样体积等参数。

　　如需要，可采用间隔进样的方式进样。

　　设置好后，将待测样品溶液的信息以列表的方式显示出来，并保存序列文件。
 

　　五、进样与分析

　　1.进样操作：

　　采用HPLC专用进样针进样，进样体积应为定量环体积的2~4倍。

　　进样时先将进样针插入进样器，再右旋进样阀门将样品全部打入，再将进样阀左旋回原位。等5~10秒后将进样针抽出。

　　2.分析过程：

　　点击工作站中的“Start/stop Batch”键开始进样分析。仪器将会自动根据软件中设定的先后顺序开始进样，直至所有的样品全部进样。

　　如软件中相应的位置上并没有放置样品瓶，仪器将会自动识别并跳过该样品进下一个样品。

　　样品分析结束后自动保存色谱图。

　　六、数据处理与关机

　　1.数据处理：

　　在工作站中选择需要处理数据的序列，点击定量方法并选择方法文件进行数据处理。

　　根据需要设置积分参数、定量方法等，进行数据处理和结果分析。

　　2.关机操作：

　　先关闭氘灯电源。

　　用超纯水或甲醇等溶剂清洗仪器，包括进样阀、色谱柱等部件。

　　清洗完后先停流，再关闭高压泵和仪器电源。

　　如分析过程中使用缓冲液作为溶剂，则先用超纯水冲洗色谱柱约30分钟，再用甲醇冲洗色谱柱约30~50分钟；若只用有机溶剂和水作为溶剂，则直接用甲醇冲洗色谱柱40~70分钟。冲洗色谱柱时溶剂流量均为1ml/min。

　　七、注意事项

　　1.日常维护：定期对仪器进行清洁和维护，包括清洗进样阀、更换蠕动泵清洗瓶中的甲醇等。

　　2.安全操作：在操作过程中注意个人防护和安全操作规范，避免溶剂溅出或触电等危险情况发生。

　　3.仪器校准：定期对仪器进行校准和验证，确保仪器性能和结果的准确性。

　　通过以上步骤的正确操作和使用指南，可以确保戴安高效液相色谱仪的正常运行和准确分析。