如何更好的使用赛默飞色谱柱
时间：2022-12-14 阅读：356
１、拿到赛默飞色谱柱后先阅读说明书，了解赛默飞色谱柱的具体性能：耐受温度、耐受ＰＨ等。以及赛默飞色谱柱的冲洗和保存条件。经过柱校测试确认赛默飞色谱柱本身没有问题后方可正常使用。
２、样品充分前处理，确保样品的洁净；使用保护柱或在线过滤器，根据实际情况更换保护柱芯或滤片。
３、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
４、应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中如果流动相中使用了缓冲盐，避免出现盐析。
５、选择使用适宜的流动相（尤其是PH），以避免固定相被破坏，PH过低共价键断裂，键和相水解；PH过高硅胶溶解。
６、赛默飞色谱柱使用过程中，如果压力升高，或出现污染，选择适当的条件冲洗或反冲。
适用于C18、C8、C4、C1、苯基、PFP、AQ等
使用至少20倍柱体积的含有≥30%谁的极性邮寄溶剂（如乙腈）作为流动相除去柱子中的缓冲盐；使用至少20倍柱体积的含有95%极性邮寄溶剂（如乙腈）冲洗赛默飞色谱柱。
污染物的去除常规星期后柱校没有明显恢复时，使用50%异丙醇／乙腈以低流速清洗20倍柱体积以除去污染物。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为赛分针对自己品牌的反相赛默飞色谱柱冲洗的参考意见）
适用于氨基柱、氰基柱
常规清洗：乙腈：水＝60:40条件对赛默飞色谱柱进行冲洗，清洗时不建议水相比例超过40%，过高使用水相容易导致键和相水解。
赛默飞色谱柱再生：当赛默飞色谱柱经过长期使用，柱校降低时，可以对赛默飞色谱柱进行再生，乙腈：水（水中加入0.05%氨水）＝60:40条件冲洗30倍柱体积。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为赛分针对自己品牌的赛默飞色谱柱冲洗的参考意见）
适用于离子交换柱SCX、SAX冲洗方法
日常冲洗：用****水冲洗30个柱体积除盐，然后用20%甲醇或乙腈冲洗20个柱体积后保存在20%甲醇或乙腈中。
长期保存：用****水冲洗30个柱体积去除盐，然后用50%乙腈；50%水冲洗20个柱体积后保存在50%乙腈：50%水中。
再生：先用高浓度的缓冲盐（不超过１Ｍ），然后再用****水洗，****乙腈或甲醇冲洗，再用20%乙腈或甲醇保存。（以上操作可根据实验室自身SOP视情况而定，此方法仅为赛分针对自己品牌的赛默飞色谱柱冲洗的参考意见）