成都摩尔科学仪器有限公司提供的 氨基酸柱采用ODS键合硅胶为填充剂，填料采用高度可控的单分子层形成和封尾技术制备得到。通过柱前衍生化方法，18种氨基酸在柱上可获得优异的分离。

olumn:Sepax AAA, 4.6×250 mm

phase:A: ACN : 0.1 M NaAc = 7 : 93 (v/v), pH=6.5; B: ACN : H2O = 80 : 20 (v/v)

Time (min): B (%):0 15 18 25 30 30.01 450 15 24 40 40 100 100

Flow rate:1.0 mL/min

Temperature:36 oC

Detection:UV 254nm

Injection Volume:5 µL

Sample:18 Amino acids

1.Asp    2.Glu    3.Ser    4.Gly    5.His    6.Arg
7.Thr    8.Ala    9.Pro    10.Tyr    11.Val    12.Met
13.Cys    14.Ile    15.Leu    16.Phe    17.Trp    18.Lys

氨基酸柱特点

1.固定相以高纯硅胶为基质，采用高纯度键合试剂，通过创新*的技术确保zui大单分子层覆盖和全封尾。

2.高度可控的单分子层形成和封尾技术保证了可靠的柱间重现性。

3.填料表面覆盖zui大化，因此具有优异的稳定性。

4.填料为均一的球形颗粒，孔径为120Å。通过运用*的填装技术装填得到的色谱柱柱床密度均一稳定，可保证具有zui高的柱效。

订购信息

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Sepax AAA (氨基酸分析) 色谱柱手册色谱柱信息
Sepax AAA (氨基酸分析) 色谱柱专为分离与分析游离氨 基酸而设计。该柱以硅胶基质反相固定相材料为填料。Sepax AAA 固定相以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质，采 用高纯度键合试剂，通过创新*的技术确保zui大单分子层 覆盖和全封尾。 高度可控的单分子层形成和封尾技术保证了 可靠的柱间重现性。Sepax AAA表面覆盖率已达到zui大化， 因此具有优异的稳定性。该填料为均一的球形颗粒，孔径为 120 Å，比表面积为 300 m2 /g。 通过运用*的匀浆填装技术装填得到的Sepax AAA柱柱床密度均一稳定，因此可保证具 有zui高的柱效。通过PITC 衍生化方法，18种氨基酸可在Sepax AAA 柱获得高分辨率的快速分析。
色谱柱的安装和操作 
色谱柱在运输过程中或在没有使用时，它的两端总是用 堵头进行密封。当将色谱柱接入色谱仪器系统时，首先移去 两端的堵头。请注意将流动相流动的方向与柱上标记的方向 保持*。除非出于特殊考虑，例如为了清除堵在色谱柱入 口端的脏污等而需要将色谱柱反接以进行冲洗时，建议用户 在接上色谱柱时一定要遵循柱上标记的方向。由于色谱柱的 连接是整个色谱操作过程的一部分，如果密封卡套过紧，或 安装不合适，或者密封卡套与色谱柱端口不匹配，都有可能 导致溶液的泄漏。请按照下面步骤将色 ，从而将色谱柱接入 HPLC 系统： (a) *次使用的管线，请依次将管线接头和密封卡套装在 径 1/16"的管线上。密封卡套的宽口端应朝向管线接头。 (b) 将管线紧紧插入色谱柱的接口，向前滑动密封卡套和管 线接头，并使管线接头的 ，然后拧紧管线接头。 (c) 在用力将管线压入 螺帽再进一步紧固。 ) 对色谱柱的另一端采用上述方法进行操作。 新的 Sepax AAA 柱是置于甲醇（或乙腈）水溶液中运输 的，在储存和运输过程中，硅胶填料可能会干涸。这时* 用 10-20 倍柱体积的纯有机溶剂如甲醇、乙腈进行冲洗以活化色谱柱。接着可用用户自己选择的流动相冲洗色谱柱。流 速由 0.1mL/min 逐渐升至所需的操作条件，直至基线稳定为 止。如果柱压和基线波动较大，这可能是气泡进入了色谱柱中这时可用较高流速冲洗色谱柱 2-5 分钟，例如对于 4.6x250 mm 的色谱柱可采用流速 1.5mL/min。
样品和流动相
为了避免色谱柱的堵塞，所有样品和溶剂，包括缓冲溶 液在内，都必须在使用前用 0.45 μm 或 0.2 μm 的滤膜过滤。 Sepax AAA 键合固定相的性质为非极性，*流动相为有机 试剂与水的混合物（如甲醇或乙腈的水溶液等）。流动相在 使用前需要脱气。一个简单的脱气方法是将流动相在水泵形成的真空下超声 5 min。当 Sepax AAA 柱用于梯度洗脱 时，起始流动相通常为 5%甲醇（或乙腈）。
色谱柱的保护
pH 避免在 pH 低于 2 或高于 11 的条件下使用 Sepax AAA 柱。较高的 pH 会溶解硅胶，从而使部分或全部的烷基 链从硅胶表面脱落，引起分离效率的 。为了获得zui大的分离效果和延长柱的使用寿命，请尽量 使用 pH 在 3 - 7.5 范围内的流动相。
压力 尽管 Sepax AAA 柱可在高至 5000psi 的压力下使 用，但正常的操作压力应当低于 3000psi。长时间在高压下运 行会损坏色谱柱和*。由于压力来源于流速，因此zui大 流速将受制于系统所能承受的压力。一般而言，柱压会随着 色谱柱使用时间的增加而逐渐增加。压力突然增加预示色谱柱入口端的筛板发生了堵塞。在这种情况下，建议将色谱柱 反接后用适宜的溶剂进行冲洗。
温度
zui高操作温度为 60o C。长时间在高温(>75o C)下操作 也会损坏色谱柱，这种情形在高的pH (>8)条件下特别突出。
储藏 *不用时，请不要让水或缓冲液存留在色谱柱 中。在替代缓冲液时，请用至少 20-30 倍柱体积的 50%甲醇 （或乙腈）水溶液冲洗色谱柱，再用 20-30 倍柱体积的纯有机溶剂如已睛进行冲洗。。每根色谱柱在运输过程中均会附有 两个可拆卸的堵头。为了防止柱床干涸，请用堵头塞紧色谱柱的两端。
Sepax’s AAA 反 过 色谱柱氨基酸分析步骤
1. 原理 这种分析氨基酸的方法基于柱前衍生步骤，衍生化反应 是在碱性条件下完成的，采用异硫氰酸苯酯和游离氨基酸 应生成的 PTC-氨基酸衍生物可于 UV 254 nm 处被检测到。通 PITC 衍生法改善的氨基酸分离同样使其分析更有效。