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经销商厂商性质
上海市所在地
参数规格:
产品名称:甲型流感病毒荧光PCR法检测试剂盒
产品分类:荧光PCR法
货号:CP99100
产品规格:50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
山羊血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA Kit Goat angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
山羊血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)ELISA Kit Goat angiotension Ⅰ,ANG-Ⅰ ELISA Kit
山羊褪黑素(MT)ELISA Kit Goat Melatonin,MT ELISA Kit
山羊铜蓝蛋白(CP)ELISA Kit Goat Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
山羊瘦素(LEP)ELISA Kit Goat Leptin,LEP ELISA kit
山羊生长激素(GH)ELISA Kit Goat growth hormone,GH ELISA KIT
山羊腺原氨酸(T3)ELISA Kit Goat Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit
山羊热休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit Goat Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA KIT
山羊醛固酮(ALD)ELISA Kit Goat aldosterone,ALD ELISA Kit
山羊前列腺素内过氧化物合酶1(前列腺素G/H合酶和环氧合酶)(PTGS1)ELISA Kit Goat PTGS1 ELISA kit
山羊前列腺素G/H合酶2(PTGS2)ELISA Kit Goat Prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2 ELISA kit
山羊前列腺素E2(PGE2)ELISA Kit Goat prostaglandin E2,PGE2 ELISA kit
山羊皮质醇(Cortisol)ELISA Kit Goat Cortisol ELISA Kit
山羊脑啡肽(ENK)ELISA Kit Goat enkephalin,ENK ELISA Kit
山羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA Kit Goat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
山羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA Kit Goat Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
山羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA Kit Goat Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit
甲型流感病毒荧光PCR法检测试剂盒山羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit Goat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
山羊口蹄疫抗体(FMDV IgM)ELISA Kit Goat antibody against Foot and Mouth Disease(FMDV)IgM ELISA Kit
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。