HepG2人肝癌细胞说明
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T25m2HepG2人肝癌细胞说明

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-06-10 20:21:51
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上海莼试生物技术有限公司

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产品简介

HepG2人肝癌细胞说明收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

详细介绍

收到冻存细胞的处理方法:
1.37°C水浴预热培养基;
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞,1000rpm离心5min
4.弃上清,加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中,轻轻晃匀;
5.置于37°C5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧)
6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

 描述:(1)公司可提供新鲜或冻存细胞株;(2)细胞株数量约 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
      发货:客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基;2、说明书及注意事项;3、售后服务标准。
      保存和应用:客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜细胞株,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研,不得用于临床应用。

产品名称

HepG2人肝癌细胞说明

规格

T25m2

货号

CS-963219

实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 
2
.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理; 
3
.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 
4
.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 
5
.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4放置;
3、剩下的组织再加入34mL酶消化液,混悬10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10 FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37 5CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
2PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4条件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4冰箱中孵育细胞过夜;
5PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37条件下放置1h
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,375%CO2培养。
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Amlodipine besylate  111470-99-6  中文名:苯磺酸氨氯地平  分子式:C26H31ClN2O8S  度:99.0%  关键词:    小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装

Amlodipine  88150-42-9  中文名:氨氯地平  分子式:C20H25ClN2O5  度:98.0%  关键词:    小鼠巨噬细胞集落刺激因子(mouse M-CSF)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装

Amlexanox ethyl ester  68301-99-5  中文名:  分子式:C18H18N2O4  度:98.0%  关键词:    小鼠细胞色素C(mouse Cytochrome C)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  

Amlexanox  68302-57-8  中文名:氨来呫诺  分子式:C16H14N2O4  度:98.0%  关键词:    小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-1(mouse IGFBP-1)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装

Amitriptyline   549-18-8  中文名:盐酸阿米替林  分子式:C20H24ClN  度:98.0%      小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-2(mouse IGBPF-2)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装
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