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纤维素含量(CLL)测试盒样品收集、处理及测定意义

时间:2024-05-16      阅读:43

纤维素含量(CLL)测试盒样品收集、处理及保存方法:


1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 乾思细胞


2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。


3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。


4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液


5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


测定意义:


纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖,通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起,是植物细胞壁的主要结构成分。纤维素是一种重要的膳食纤维,是自然界中分布含量最多的一种多糖。


测定原理:


纤维素为β-葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热能分解成β-葡萄糖。β-葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β-糠醛类化合物。β-糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合,生成糠醛衍生物。颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。


需自备的仪器和用品:


可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、80%乙醇、、浓硫酸(不允许快递)、研钵和蒸馏水。

试剂组成和配制:


试剂一:液体×1瓶,4℃保存。


试剂二:液体×1瓶,4℃保存。


试剂三:粉剂×1瓶(棕色),4℃避光保存。临用前加入667μL无水乙醇,盖紧后充分混匀,再加入9.333 mL蒸馏水混匀,避光保存。


试剂四:粉剂×1管,4℃避光保存。临用前加1 mL蒸馏水,充分溶解。


标准品:粉剂×1瓶,临用前加10 mL蒸馏水,充分溶解。1μmol/mL标准液,4℃避光保存。





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