ATCC细胞分离液快速操作说明
时间:2018-05-04 阅读:241
ATCC细胞分离液快速操作说明和使用及保存中的注意事项:
注意:1,分离液和所分离样本一定在20℃水浴箱中复温20 分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果。
2,使用无静电反应的离心管,*使用未经过碱处理的玻璃离心管。
3,所有操作过程一定要在无菌条件下进行。
4,*抗凝剂选择:EDTA、枸橼酸、肝素。应注意在血液稀释过程中应去除抗凝剂
体积。
A. 小量分离-使用1-2ml新鲜抗凝血,骨髓,脐带血:
1,取新鲜抗凝血1-2ml,与全血及组织匀浆稀释液(Cat#:2010C1119)1:1 混匀;
2,小心加于与混合液等体积的细胞分离液之液面上;
3,以400g(约1500 转/分)离心15 分钟(半径15cm 水平转子);
此时离心管中由上至下细胞分为四层。*层;为血浆层。第二层;为环状乳白色淋巴细胞层。第三层;为透明分离液层。第四层;为红细胞层。收集第二层细胞放入含4-5ml 细胞洗涤液(Cat#:2010X1118)的试管中,充分混匀后,以1800 转/分离心20 分钟,弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2 次即得所需细胞。
B. 中量分离-使用5-10ml新鲜抗凝血,骨髓,脐带血:
1,取新鲜抗凝血5-10ml,与全血及组织匀浆稀释液(Cat#:2010C1119)1:1 混匀;
2,将混合液小心叠加于细胞分离液之液面上;(混合液:分离液=2:1)
3,以500g(约1800 转/分)离心15 分钟(半径15cm 水平转子);
此时离心管中由上至下ATCC细胞分为四层。*层;为血浆层。第二层;为环状乳白色淋巴细胞层。第三层;为透明分离液层。第四层;为红细胞层。收集第二层细胞放入含10ml 细胞洗涤液(Cat#:2010X1118)的试管中,充分混匀后,以1800 转/分离心20 分钟,弃去上清留沉淀细胞重新悬起。重复洗涤2 次即得所需细胞。
100290-201002 含量测定 100mg *
100291-200402 HPLC法含量测定 100mg *
100292-200201 含量测定 50mg *
100294-200602 含量测定 100mg *
100296-200303 HPLC法含量测定 1000mg *钠
100298-201002 含量测定 100mg α-*
100299-200001 鉴别用 50mg *
100300-200001 含量测定 50mg *
100301-199901 含量测定 50mg 阿司咪唑
100302-200602 含量测定 100mg *
ATCC细胞