中国仓鼠卵巢细胞(CHO-S)
细胞介绍
贴壁生长及悬浮生长均可（用于蛋白表达时，应使用悬浮生长状态，此时细胞生长状态更好，比表面积更高，生物反应器中的传质、传热效率更高，同时也可提高生物反应器空间使用效率。工业上大规模生产单抗，重组蛋，大部分使用悬浮培养法来生产）

细胞特性
1来源：中国仓鼠
2形态 ：成纤维细胞样
3含量：>1x10 6 个/mL
4污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5规格：T25 瓶或者1mL冻存管包装运输和保存 ：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

中国仓鼠卵巢细胞(CHO-S)细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤
一． 培养基及培养冻存条件准备：
1）培养基信息：EX-CELLCD-CHOCHOSerum-free Medium,ChemicallyDefined(Sigma-Aldrich,货号：24361C)添加物：L-*（Sigma-Aldrich,货号：G8540-25G）Anti-Clumping Agent(Gibco，货号：01-0057AE)备注 ：CD-CHO CHOSerum-freeMedium 请按照培养基配制说明书配制，L-*配制浓度为200mM，工作浓度为8mM（即稀释25倍，如500mlCHOSerum-freMedium 中添加20ml200mML-*，抗结团剂使用为1%，即500mlCHOSerum-freeMedium中添加5ml抗结团剂）
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二． 细胞处理 ：
传代、转染、建库及实验室规模小试方法：赛百慷（上海）生物技术股份有限公司提供的CHO-S细胞为已驯化的细胞，具有良好的适应悬浮生长及适应无血清培养基生长特性。
传代方法：
1.10cm皿中培养：使用计数器（计数器或者血球计数板计数计数，接种密度为3×105个细胞/ml接种于提前37℃预热的新鲜培养基中（建议培养基取7-8ml，此时细胞生长状态较好），置于摇床上生长，转速为120-130rpm，湿度为70-80%，5%二氧化碳，温度为37℃。
2.培养约2-3 天，细胞密度达到 1×106个活细胞/ml时，应 1000rpm，25℃离心5min，离心后计数（此时应稀释），然后接种密度为3×105个细胞/ml接种于提前37℃预热的新鲜培养基中。细胞数目足够时，可冻存。也可选择125ml或者250ml摇瓶中培养细胞。（注意细胞培养液体积一般在总体积的五分之一，如在125ml摇瓶中加入25ml培养物，应注意在摇瓶中培养细胞时应将瓶盖稍微拧松，以便于气体交换，同时也不宜拧得过松，防止细胞污染）
转染 方法：
在连续5代细胞密度未超过2×106个活细胞/ml时，可以使用 FreeStylaMax转染试剂（Gibco，货号：16447）在CDCHOSerum-freeMedium中直接转染。（注
意：Anti-ClumpingAgent会干扰 FreeStyleMax转染试剂转染效率，同时也会干扰其他脂质体型转染试剂的转染效率）
建库方法 ：
若需要建库，可将细胞接种于125ml摇瓶中（接种密度为3×105个细胞/ml，总体积为25ml），此方法同样适用于稳定表达所需要蛋白的细胞株的建库工作。建库时，需要先建初级库（master bank）（一般为10支，每支细胞总数不少于4.5×107个细胞），此步骤结束后，从冻存的初级库中取出一支复苏，按照同样步骤建次级库（working bank）（相同的，一般为10支，每支细胞总数不少于 4.5×10 7个细胞）。实验室规模小试方法：将挑选出的稳定细胞株从96孔板到24孔板到6孔板到 10cm皿中逐级扩大培养后（此时需要注意在培养过程中应及时保种，以防止后续步骤出现污染，及应对可能的表达量衰退现象）以 3×105个细胞/ml接种于125ml 摇瓶中，转速为120-130rpm，温度为 37℃，湿度为70-80%，连续培养一周，每天取样做出相应的细胞生长曲线，细胞活率曲线，蛋白表达曲线，可根据实际情况，每天取样测出培养基中葡萄糖含量，以便决定是否要补加葡萄糖，同时可使用CHOFeedioreactorSupplement作为细胞发酵中补料，同时做出相应的细胞生长曲线，细胞活率曲线，蛋白表达曲线，为中试放大补料添加做出合理数据支持。

中国仓鼠卵巢细胞(CHO-S)注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。