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大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)
细胞介绍
该细胞是大鼠胰岛细胞RIN-m的克隆,分泌胰岛素及L型多巴脱羧酶,不产生生长激素抑制激素。
细胞特性
1)来源:大鼠,胰岛
2)形态:上皮细胞样,贴壁生长
3)含量:>lxl06 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存:使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后,请先在显微镜下检查细胞生长状态,并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后,再次检查细胞状态。若状态良好,可进行细胞后续处理操作,按照以下方式进行。若发现可疑污染物,请及时与我们取得。
细胞用途:仅供科研使用。
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备:
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPIVM-1640:GIBCO,货号 31800022,添加 NaHC031.5g八,D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸钠O.llg八),90%;优质胎牛血清,10%。
2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
2)细胞处理:
复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将
细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。 将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约lml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加1〇%DMSO后进行冻存。
大鼠胰岛0细胞瘤细胞(RIN-m5F)注意事项:
收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。