大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)
细胞介绍
NR8383(正常大鼠，1983年)来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil肺细胞连续培养液存在下培养了大约8-9个月。随后，不再需要外源生长因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383细胞，并三次用软琼脂亚克隆。细胞表现出巨噬细胞的特性，吞噬酵母多糖和铜绿，非特异性脂酶活性，Fc受体，氧化降解；分泌IL-l,TGF-(3和IL-6,可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应*，分泌TGF-0前体。在*刺激下，TGF-(3mRNA表达也上升。细胞对内毒素敏感。1-10钠克/毫升的LPS水平抑制增生达50%。即使达到0.001毫克/毫升的水平，LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆NR8383细胞株提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源，可以用于体外研究巨响细胞相关活性。

细胞特性
1)来源：肺；巨噬细胞
2)形态：巨噬细胞，半悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装

细胞接受后的处理：
1)收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3)弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4) 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的*培养基。
5)接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得。

大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)细胞用途：仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考

一.培养基及培养冻存条件准备：

1.准备F-12K培养基（F-12K，GIBCO,货号21127-022)，90%;优质胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二.细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培
养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。（该细胞建议使用*种方法，将所有细胞收集起来）
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管
中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。

大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。