elisa试剂盒不同类型的样本的处理方法
时间:2017-05-25 阅读:224
1、进口elisa试剂盒血清
血清是zui常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃放置一晚,使血清析出。(将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g离心20分钟,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。
2、 血浆
用含抗凝剂的*或离心管采集血液标本,标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
常用的抗凝剂为EDTA、*和*等,进口elisa试剂盒检测时还应仔细阅读试剂盒说明书,检查试剂盒是否对抗凝剂有特殊要求。
3、 细胞培养上清
取细胞培养上清到离心管,1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。
4、 尿液、唾液等其他液体生物样本
1000×g离心20min,取上清即可检测。
总的来说,因为ELISA只能检测可溶性蛋白的含量,所以应保证所有样本均为澄清的液体,沉淀或悬浮物都应离心去除。
进口elisa试剂盒为了保证检测的准确性,保存于-20℃或-80℃的样本在1~6个月内检测;4℃保存的样本应在1周内进行检测。另外,还应保证样本不含NaN3,因为NaN3会抑制HRP的活性,从而导致假阴性的结果。