【概要】

　　玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又称F-2毒素，是玉米赤霉菌的代谢产物，具有雌激素样作用，具有较强的生zhi毒性和致畸作用，可引起动物发生雌激素亢进症， 导致动物不孕或liu产，对家禽、猪、牛和羊的影响较大，给畜牧业带来很大的经济损失。

　　【适用范围及性能】

　　用于定性、定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的玉米赤霉烯酮时的样品前处理。

　　柱容量：≥500ng

　　回收率：≥90%

　　【试验原理】

　　本产品的测定的基础是抗原抗体反应，玉米赤霉烯酮单克隆抗体连接在柱内凝胶上，样品中的玉米赤霉烯酮经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢的通过玉米赤霉烯酮免疫亲和层析柱，在免疫亲和柱内，玉米赤霉烯酮与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱玉米赤霉烯酮，然后注入到分析仪器中用于检测。

　　【包装组成】

　　根据不同规格，每一个盒中包含5/25支玉米赤霉烯酮免疫亲和层析柱及1份说明书。

　　【需要而未提供的设备及试剂】

　　设备：

　　1. 高速均质器或组织匀浆机

　　2. 粉碎机

　　3. 200mL/50mL量筒

　　4. 天平：感量0.1g

　　5. 微量移液器：单道 100mL～1000mL

　　6. 槽纹滤纸(折叠快速定性或定量滤纸)

　　7. 玻璃微纤维滤纸(1.5mm孔径)

　　8. 50mL漏斗

　　9. 一次性玻璃试管

　　10. 泵流操作架(包括空气泵，不同容积的玻璃注射器等)

　　试剂：

　　1. 甲醇(色谱级)

　　2. 蒸馏水或去离子水

　　3. pH7.0磷酸盐缓冲溶液(PBS缓冲液)：称取8.0g氯hua钠，1.2g*，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯hua钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值至7.0，后用纯水稀释至1000mL

　　【试剂配制】

　　样品提取液：配制甲醇-水(8：2)溶液作为样品提取液

　　【样本处理步骤】

　　(一)花生，玉米，大米，小麦及其制品和饲料

　　1. 称取50g粉碎的样品于100mL容量瓶中，加入5.0g氯hua钠，以样品提取液定容;

　　2. 转移至均质杯中，在均质器上高速搅拌，提取2min;

　　3. 4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤;

　　4. 取10mL滤液并加入40mLPBS缓冲液稀释，用玻璃微纤维滤纸过滤，取过滤后液体待测;

　　5. 将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器;

　　6. 将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约1滴/S的流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体;

　　7. 以10.0mL的PBS溶液和去离子水依次淋洗柱子1次，流速约为1-2滴/S，弃去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体;

　　8. 准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱，流速为1 滴/S，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。

　　(二)啤酒，黄酒等酒类

　　1. 取10mL试样脱气后与90mLPBS缓冲液混匀，用玻璃微纤维滤纸过滤，取过滤后液体待测;

　　2. 将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器;

　　3. 将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使溶液以约1滴/S的流速缓慢通过免疫亲和柱，直至2~3mL空气通过柱体;

　　4. 以10.0mL的PBS溶液和去离子水依次淋洗柱子1次，流速约为1-2滴/S，弃去全部流出液，并使2mL~3mL空气通过柱体;

　　5. 准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱，流速为1 滴/S，收集全部洗脱液于玻璃试管中，供检测用。

　　【结果判定】

　　经免疫亲和柱净化后，收集到的甲醇洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测，也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。收集到的1mL洗脱液中的玉米赤霉烯酮含量相当于1g样品中玉米赤霉烯酮含量。

　　【注意事项】

　　1. 玉米赤霉烯酮危害很大，应戴手套操作;

　　2. 不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。

　　【贮藏条件及保存期】

　　贮藏条件：亲和柱可于常温保存，2-8℃储存可延长有效期，不可冻存。

　　保存期：该产品有效期为12个月。