产品名称：Cell Counting Kit-8 (CCK-8试剂盒)说明书
规格：100次
储存条件:—20℃,12个月
用途:又称培养细胞消化液,用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。
注意事项:无菌溶液，经过滤除菌处理。主要由胰酶或胰蛋白酶、EDTA组成,含酚红。自备材料：
1、 PBS、Hanks液或无血清培养液
2、 显微镜
3、 离心机
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  *细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项：
1、 尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 过程中，要特别注意避免消化液被细菌污染。
3、Trypsin-EDTA solution 消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明： 
1. 贴壁细胞的消化： 
a.吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
b.加入少量胰酶细胞消化液(含酚红，不含EDTA)，略盖过细胞，室温放置30秒至2分钟。不同的细胞消化时间有所不同。 
c.显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液(含酚红，不含EDTA)。加入含血清的*细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。 
d.如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液(含酚红，不含EDTA)重新消化。 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液(含酚红，不含EDTA)后，加入含血清的*培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。 
2. 组织的消化： 
a.不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。 附录：不同胰酶细胞消化液的比较和选择 
1. 如果希望消化能力比较强，推荐选择C0201胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和C0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红)，这两种胰酶细胞消化液都含有EDTA，消化能力相对更强一些。 
2. 如果希望观察比较方便，推荐选择含酚红的C0203 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红)和C0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红，不含EDTA)。 
3. 对于酚红可能会干扰后续的测试分析，推荐选择不含酚红的C0201 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)和C0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，不含EDTA)。 
4. 对于EDTA可能会干扰后续的测试分析时，推荐选择不含EDTA的C0205 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，不含EDTA)和C0207 胰酶细胞消化液(0.25%胰酶，含酚红，不含EDTA)。 
5. 对于胰酶特别敏感的细胞，即对于消化时间特别快、消化时间比较难控制的情况，推荐选择C0202胰酶细胞消化液(0.05%胰酶)或C0204 胰酶细胞消化液(0.05%胰酶, 含酚红)。
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