微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

镉 AR,99.0%邻二氯苯标准溶液 0.099mg/ml，基体：异辛烷CR(Mouse Calretinin) ELISA Kit  小鼠钙结合蛋白

镉 CP,99.0%间二氯苯标准溶液 0.114mg/ml，基体:异辛烷HABP(Mouse Hya]uronate binding protein) ELISA Kit  小鼠透明质酸结合蛋白

镉 SP 分析标准品，99.3%CyPA(Mouse cyclophilin A) ELISA Kit  小鼠嗜环蛋白/亲环素A

镉 99.99% metals basis标准溶液 101µg/mLBMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit  小鼠骨形成蛋白6

镉 ACS标准溶液 1.00mg/mL，基体：甲Mouse lymphocyte factor ELISA Kit  小鼠因子

钙黄绿素 AR二磷标准溶液 1.00mg/mlADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit  小鼠抗利尿/血管/精

结晶紫 ACS, ≥90.0%三标准溶液 1.00mg/mlAcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit  小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯

无水氯化钙 99.99% metals basis1，1-二氯乙烯标准溶液 0.800mg/ml，基体：甲PA-IgG/M/A(Mouse plaet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit  小鼠抗血小板抗体IgG/M/A

发酵乳杆菌马心肌红蛋白相对分子质量标准物质 马心肌红蛋白:16951信号通路WNT8A抗体

纯度标准物质 99.7%信号通路Wnt2抗体

无机元素混合溶液标准物质 Al、Ca、K、Na、Pb、Se:1.00μg/mL;As信号通路Wnt4抗体

无机元素混合溶液标准物质 Al、Ca、K、Na、Pb、Se:5.00μg/mL;As信号通路Wnt6抗体

无机元素混合溶液标准物质 Al、Ca、K、Na、Pb、Se:5.00μg/mL;AsWD重复膜蛋白61抗体

一砷溶液标准物质 0.335μmol/gWnt1信号通路蛋白3抗体

标准物质 99.9％湿疹血小板减少伴免疫缺陷综合征相关蛋白抗体

对酚标准溶液1.00mg/ml，体：WDR68蛋白抗体

萘标准溶液 51.7μg/mL，体：WDR91蛋白抗体

 98%P53应答因蛋白5抗体

除草 分析标准品WD重复膜蛋白19抗体

除草 分析标准品,99.9%化WEE1蛋白抗体

镍标准溶液 100(20℃)μg/mL，体:1%HNO3糖类应答元件结合蛋白ChREBP抗体

硝根离子(NO5-)标准溶液1000μg/ml,溶剂:水肾母瘤蛋白抗体

硝根离子(NO6-)标准溶液100μg/ml,溶剂:水信号通路Wnt16抗体