MG1655 感受态细胞100ul*10说明书
MG1655 感受态细胞100ul*10说明书
MG1655 感受态细胞100ul*10说明书
MG1655 感受态细胞100ul*10说明书

MG1655 感受态细胞100ul*10说明书

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2019-03-09 22:16:17
974
属性:
产地:进口;加工定制:否;适用领域:其他;
>
产品属性
产地
进口
加工定制
适用领域
其他
关闭
上海谷研实业有限公司

上海谷研实业有限公司

初级会员9
收藏

组合推荐相似产品

产品简介

MG1655 感受态细胞100ul*10说明书取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的SOC或LB平板,37℃倒置培养12-16小时。涂布用量可根据具体实验来调整,如转化的DNA总量较多,可取100ul左右的转化产物涂板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300ul的转化产物涂板。

详细介绍

操作方法:
一 、MG1655 感受态细胞100ul*10说明书热激转化法
1.    从-80℃冰箱取出感受态细胞冰浴融化后,吸取100μl感受态细胞转移到-20℃过夜预冷的摇菌管中,加入质粒或连接产物,轻轻混匀,冰浴30分钟。
2.    42℃水浴热激60秒,迅速放回冰中并静置2分钟,该过程不要摇动摇菌管。
3.    向摇菌管中加入900μl 37℃温浴的SOC或LB(SOC培养基可提高2-3倍转化效率),37℃、180rpm、45分钟复苏菌种。
4.    根据实验要求(质粒,重组连接产物转化),吸取不同体积已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的LB琼脂培养基上,将细胞均匀涂开。将平板置于37℃至液体被吸收,倒置平       板,37℃过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
二、10分钟快速转化法                             
注:在使用卡那霉素,四环素等作为筛选抗性时,需要在SOC培养基中复苏以提高转化效率,当使用氨苄青霉素作为筛选抗性时,该步骤可以省略。感受态细胞-DNA混合物在冰上孵育5-10分钟后加入4倍体积的37℃温浴的SOC培养基,在37℃ 180rpm孵育1小时,然后转移到37℃预热的LB培养基上。
1. 提前15分钟将用到的筛选培养基平板拿到37℃预热。
2. DH 5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA并用手EP管底轻轻混匀,冰中静置5分钟。
3. 用200μl枪将感受态细胞-DNA混合物转移到已经37℃预热的LB培养基上,涂均匀,表面无水渍。
4. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

使用说明:
1. MG1655 感受态细胞100ul*10说明书取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min。
3. 42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养45~60min使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h。


培养方法:
MG1655 感受态细胞100ul*10说明书收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了,科研工作者又该忙碌了,大家可能都在寻找适合自己的细胞,不用急,我们帮您掌舵,让您满意!
传代方法:细胞*汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞*脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
中文名称:MG1655 感受态细胞100ul*10说明书
规格:100ul*10
用途:生化试剂。(用于科研试验研究)  
储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位: 袋

ELISA Kit for Human Estrogen-related receptor gamma

96T78-5000 pg/mL人电子传递黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)ELISA试剂盒人

ELISA Kit for Human Electron transfer flavoprotein-ubiquinone oxidoreductase, mitochondrial

96T78-5000 pg/mL人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE/ELA2/HNE)ELISA试剂盒人

ELISA Kit for Human Neutrophil elastase

96T78-5000 pg/mL人红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒人

ELISA Kit for Human Erythropoietin receptor

96T0.156-10 ng/mL人红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒人

ELISA Kit for Human Erythropoietin

96T78-5000 pg/mL人纤维连接蛋白Ⅲ型域包含蛋白5(FNDC5)ELISA试剂盒人

ELISA Kit for Human Fibronectin type III domain-containing protein 5

96T15.6-1000 umol/L果糖胺(Fructosamine)ELISA试剂盒通用

ELISA Kit for Fructosamine

96T1.56-100 ng/mL他克莫司(FK506)ELISA试剂盒通用

ELISA Kit for Tacrolimus
MG1655 感受态细胞100ul*10说明书48T甲型流感病毒H1亚型(IAV-H1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T甲型流感病毒H1亚型(IAV-H1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T甲型流感病毒H3亚型(IAV-H3)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T甲型流感病毒H3亚型(IAV-H3)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T乙型流感病毒(IBV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T乙型流感病毒(IBV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T无形体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T无形体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T东方体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T东方体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T人疱疹病毒6型(HHV-6)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T人疱疹病毒6型(HHV-6)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T冠状病毒(OC43/HKU1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T冠状病毒(OC43/HKU1)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T冠状病毒 (229E/NL63)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T冠状病毒 (229E/NL63)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T偏肺病毒(hMPV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T偏肺病毒(hMPV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

48T鼻病毒(RV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)48T鼻病毒(RV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

上一篇:感受态细胞100ul*50操作注意事项 下一篇:细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)免疫组化试剂盒​注意事项
热线电话 在线询价
提示

请选择您要拨打的电话: