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选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称:蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(Vtg)elisa试剂盒
英文名称:Nasoniavitripennis vitellogenin,Vtg ELISA Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
丁酸酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))DYRK1B Antibody2-基-4'-溴甲基联
甲基酸酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) AntibodyBOC-L-氟氨酸
甲酸酯(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-Zap-70 (Tyr493)/Syk (Tyr526) Antibody2,6-二甲基-1,二氢-3,5-吡啶二羧酸二酯
酸酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Zap-70 (99F2) Rabbit mAbCBZ-L-缬氨酸
酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))Zap-70 (136F12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)多紫杉
己酸酯(Standard for GC,>99%(GC))p70 S6 Kinase (49D7) Rabbit mAb硫代甲酰
棕榈酸酯(standard for GC,≥99%(GC))p70 S6 Kinase (49D7) Rabbit mAb2-甲基--2-
异辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))Zap-70 (L1E5) Mouse mAb甲基丁炔-3
(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-Syk (Tyr525/526) (C87C1) Rabbit mAbN-Cbz-L-蛋氨酸
二二(standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-Syk (Tyr525/526) (C87C1) Rabbit mAb(S)-(+)-间磺酸缩水甘油酯
二二甲(standard for GC,≥99.5%(GC),含0.01% BHT稳定剂)Phospho-Syk (Tyr525/526) Antibody羟基酮
二酸酯(Standard for GC,>99%(GC))BATF (D7C5) Rabbit mAb (PE Conjuga)三异基亚酸酯
戊酸酯(standard for GC,≥99.5%(GC))Syk Antibody2-溴-7-羟基萘
酸酯(Standard for GC,≥99.5%(GC))Syk Antibody二酸甲酯
2-甲基四(MeTHF)(Standard for GC,≥99.5%(GC))SimpleChIP® Human GLA Promor Primers2--氟甲
异戊烷(Standard for GC,≥99.7%(GC))Lck (V49) Antibody四二甲酸酐
酸甲酯(MA)(Standard for GC,>99%(GC))Phospho-Syk (Tyr323) Antibody槲皮素
丁酸甲酯(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-Syk (Tyr323) Antibody(N-Boc-氨甲基)甲酸
蝶蛹金小蜂卵黄蛋白原(Vtg)elisa试剂盒5H-5-甲基-6,7-二氢环戊基吡 98%磷酸化中心粒蛋白Nudel抗体乙酸正酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)鲤疱疹病通用探针法荧光定量PCR试剂盒反,反-2,4-壬二 >85.0%(GC)类固脱氢酶样蛋白NSDHL抗体乙酸正酯 AR,99.0% 麦芽香肉杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒1-辛-3- 98%磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体氢氧化铝 AR毛样枝孢霉探针法荧光定量PCR试剂盒2-戊基 ≥98%, FG磷酸化1型神经纤维瘤抗体氢氧化铝 99.6%,1μm粗球孢子菌探针法荧光定量PCR试剂盒基(2-甲基-3-基)二硫 97%磷酸化谷氨酸受体2B抗体氢氧化铝 99.8%,10μm,,高白度沙眼衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒2-基硫 96%磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体氢氧化铝 99.8%,25μm艰难梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒乙酸硫噻唑 99%磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体邻二甲酸丁苄酯 分析标准品牛肾盂肾炎棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒2-(*基硅)基三氟磺酸盐 97%磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体邻二甲酸丁苄酯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:甲指环虫属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。