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实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 核黄素转运因子3(RFT3)elisa试剂盒 |
英文名称 | Human riboflavin transporter 3,RFT3 ELISA Kit |
货号 | GOY-H74936 |
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
硬脂酸(分析标准品,≥99.5%(GC))BTAF1 Antibody六氢邻二甲酰亚
甜蜜素(标准品)VEGF Receptor 3 (C28G5) Rabbit mAb1,2,3,6-四氢邻二甲酰亚
L-山梨糖(标准品)Fibrillarin (C13C3) Rabbit mAb硒化铝
糖精钠 水合物(标准品)Fibrillarin (C13C3) Rabbit mAb5-氟烟酸
钙标准溶液(1000µg/mL,基体:5%HCI)Phospho-PRAS40 (Thr246) Antibody氨基吡啶-2-羧酸
镉标准溶液(1000μg/ml,介质:1.0mol/L 硝酸)Phospho-EGF Receptor (Tyr998) (C24A5) Rabbit mAb氟-2,吲哚二酮
铯标准溶液(1000μg/ml,溶剂:水)α-Synuclein Antibody2-吡咯甲
铈标准溶液(1000μg/ml)Acetyl-Histone H4 (Lys16) (E2B8W) Rabbit mAb (PE Conjuga)六氟酸四铜
标准溶液(0.05000mol/L(0.1N))GLI1 (L42B10) Mouse mAb1,5-萘二磺酸
标准溶液(1000μg/ml,溶剂:水)α/β-Synuclein (Syn205) Mouse mAb甲酸异酯
铅标准溶液(1000μg/ml,介质:1.0 mol/L 硝酸)α/β-Synuclein (Syn205) Mouse mAb吡唑酸频哪酯
钪标准溶液(1000μg/ml,基体:1.0mol/L HNO3)GATA-6 (D61E4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)甲基四氢邻二甲酸酐
标准溶液(1000μg/ml,溶剂:二硫化碳)EGF Receptor (C74B9) Rabbit mAb硝基-1-萘
标准溶液(0.96mg/ml,溶剂:甲)α-Synuclein (Syn204) Mouse mAb溴化钛
邻硝基标准溶液(1000μg/ml,溶剂:甲)α-Synuclein (Syn204) Mouse mAbN-丁基咪唑
间酚标准溶液(1000μg/ml,溶剂:甲)Methyl-Histone H3 (Lys4) Antibody Sampler Kit氧化镝
2,5-二甲酚标准溶液(1000μg/ml,溶剂:甲)VCP Antibody三化
一二溴标准溶液(387±18μg/ml,溶剂:甲)VCP (7F3) Rabbit mAb3,3',4,4',5-五溴联
核黄素转运因子3(RFT3)elisa试剂盒3-甲硫基-1-己 99%丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK8抗体对溴甲酸 98%酯化梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒3-巯基-1-己 98%核孔蛋白Nup37抗体邻溴甲酸 98%漏斗状带绦虫探针法荧光定量PCR试剂盒3-甲基-2--1-硫 98%核结构蛋白5抗体邻溴甲 99%小棒杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒2-甲基-3-硫 95%核苷酸结合蛋白1抗体对溴甲 99%猫衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒2-甲基四-3-硫 97%核苷酸结合蛋白2抗体对溴甲 CP鹦鹉热衣原体探针法荧光定量PCR试剂盒3-甲硫基丁 96%乙酰基转移酶10抗体对溴甲 99%索氏梭状芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒2-甲基-3-甲硫基 98%丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Nek7抗体2-溴甲 98%库蚊通用探针法荧光定量PCR试剂盒2-甲基四-3- 98%神经细胞正五聚体1抗体L-2-氨基丁酸 99%节片代凡绦虫探针法荧光定量PCR试剂盒
操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。