EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1002实验方法温馨提示:
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细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1002实验方法
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞系来源于一无精症男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法  1:2传代；5-6天一次
传代情况 P3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY1002实验方法操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

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