EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF实验方法
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2017-01-21 13:07:20
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产品名称EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF实验方法
货期3-5天
发货地上海

细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF实验方法
形态特性  淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法  1:2传代;5-6天一次
传代情况 P3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  -
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF实验方法操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

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