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实验内容:
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
资源名称 亚大韧革菌说明书
种属: Stereum│insigne
提供形式: 斜面培养物
安全等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 木腐真菌
培养基: 17
生长条件: 25℃
存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
公司专业代理ATCC菌种,产品仅用于科研质量保证,为大中型科研提供严格质量体系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ标准菌株。
菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备(见图) 菌种制备 ,其中(1)~(4)为孢子制备过程。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
放线菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28~37℃培养5~14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐(6)的种子。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶(5)液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
保藏方法:
1.传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。
2. 液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3. 载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4. 寄主保藏法
产品仅用于科研用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5. 冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。
DMEM/F12无糖(不含酚红、L-谷氨酰胺,含HEPES)乳酸乳球菌拉丁属名: Lactococcus lactis
DMEM/F12无糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)丛梗孢属拉丁属名: Monilia sp.
DMEM/F12无糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,不含酚红)烬灰吸水链霉菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
DMEM/F12无糖(不含酚红、L-谷氨酰胺)紫棕炭团菌拉丁属名: Hypoxylon fuscum
DMEM/F12无糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES,不含酚红)弗氏链霉菌拉丁属名: Streptomyces fradiae
DMEM/F12无糖(不含L-谷氨酰胺,含HEPES)地衣芽孢杆菌拉丁属名: Bacillus licheniformis
DMEM/F12无糖(含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES)劣质食用油鉴别速测包规格: 10次测试用量/包
DMEM/F12无糖(不含L-谷氨酰胺)肉毒梭菌 毒素A型*拉丁属名: botulinum Type A
DMEM/F12无糖(不含酚红,含HEPES)WAL 14507 [DSM 19850]拉丁属名: Blautia wexlerae Liu et al.
DMEM/F12(不含酚红、L-谷氨酰胺) 假灰链霉菌拉丁属名: Streptomyces pseudogriseolus
DMEM/F12(不含酚红,含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)嗜糖黄杆菌拉丁属名: Flavobacterium saccharophilum
DMEM/F12(不含酚红)双重轮丝链霉菌拉丁属名: Streptomyces biverticillatus Preobrazhenskaya
DMEM/F12无糖(不含酚红)顶青霉拉丁属名: Penicillium corylophilum
DMEM/F12(不含酚红,含L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、HEPES)Nesterenkonia flava注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
DMEM/F12(不含酚红、L-谷氨酰胺,含HEPES)酿酒酵母拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
DMEM/F12(不含酚红,含HEPES)巴氏醋杆菌拉丁属名: Acetobacter pasteurianus
CBZ-L-色酸1克RT
917-54-4甲基锂metxYLlitxium
2-Naphthoxyaceticacidwo7iumsaltβ-奈氧乙酸钠1ku超纯,98%
对羟基 4-Hydroxybenzyl alcohol,99% 623-05-2 5G 通用试剂
二基二流(剧读) 7m7w 64-9-0
亚大韧革菌说明书SPRINTNEXTGEL10%Sprint NEXT胶, 10% 蛋白组学级100MLRT
924-44-7乙醛酸乙酯溶液etxyl glyoxalate
2-fluoro-6-(trifluorometxyl)-pyridine-4-boronic acid, pinacol es 1169459-44-2
2-溴间二 2-Bromo-m-xylene,98% 576-22-7 5G 表面活性剂
酵母氮源基础 Nc
Azelaicacid杜鹃花酸50毫克PH=10
37451-68-6四丁基录化铵一水合物Tetrabutyl ammonium chloride hydrate
3,4-Dixy7no-2H-1,5-benzodioxepin-7-yl boronic acid 279261-89-1
氮丙啶羧酸甲酯 Methyl Aziridine-2-carboxylate,97% 5950-34-5 1G 通用试剂
MEM EARLES培养基(+4℃) Nc