elisa分析检测试剂盒注意事项。
时间:2020-08-07 阅读:208
一:elisa分析检测试剂盒注意事项:
1.次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
2.接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不一致。
3.培养板周围一圈孔培养液容易挥发,为减少误差,建议培养板周围的四边每孔只加培养基。
4.建议采用多通道移液器,减少平行孔间的误差,加CCK-8时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,干扰OD值。
5.若细胞培养时间较长,培养基颜色或PH发生变化,建议更换培养基后再加CCK-8,含有酚红的培养基不影响测定。
6.CCK-8对细胞的毒性非常低,其他的实验,例如中性红法或结晶紫法 ,也可在CCK- 8法检测完后继续进行。
7.可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定,CCK-8在参比波长处没有吸光值,设定参比波长的目的是为了去除由于样品浑浊所带来的吸收。
8.如果实验中待测物质有氧化还原剂,在不含细胞的培养基中加入药物,然后加入CCK- 8试剂在一定时间内检测,和不加药物的培养基进行比较(只加CCK-8试剂),如果O.D值明显偏高,则说明有反应。
9.加CCK-8试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入CCK-8试剂后轻轻震培养板,为了避免加样时由于CCK-8残留在枪头上所带来的误差,可以在加样前用培养稀释CCK-8试剂并混匀后加样。