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豇豆慢生根瘤菌图片低温存法:
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
基本信息:
资源名称 豇豆慢生根瘤菌图片
种属:Bradyrhizobiumvigna
安全等级 1
模式菌株 no
应用领域 与柱花草共生固氮
培养方法
培养基 9
生长条件 28-30
脱水存法:
①豇豆慢生根瘤菌图片沙土保存法,能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2~3次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌蒸馏水2~2.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,于4℃冰箱保存,保存期可达5~7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂(一般用脱脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管内于-20~-30℃的乙醇浴中速冻。然后,在低温下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻,熔封安瓿管,于低温下保存。保存期可达5~10年之久。
③ 石蜡油封存法,在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。
微生物菌种的培养:
⒈豇豆慢生根瘤菌图片孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
注意事项:
1、豇豆慢生根瘤菌图片忌与杀菌的化学农药一并使用,使用过的杀菌剂或者喷雾器需要*清洗后才能使用。
2、包装开启后请一次性用完,未用完应密封,并放置于阴凉、干燥的环境里保存。
3、贮存方法:在密封、阴凉、干燥之处保存
蓝PA3192 ug
apo- 转铁蛋白pAAV-helper2 ug
L- 转铁蛋白pAAV-hrGFP2 ug
反玉米素pAAV-hrRC2 ug
D- 海藻糖pAAV-IRES-hrGFP2 ug
三酸pAAV-LacZ2 ug
N- 三 ( 羟基 ) 基甘氨酸pAAV-MCS2 ug
2,3,5 化三基四唑pAAV-RC2 ug
三 ( 羟基 ) 氨基烷pAc5.1/V5-His A2 ug
三 ( 羟基 ) 氨基烷盐酸盐pAc5.1/V5-His B2 ug
曲拉通 X-100pAc5.1/V5-His C2 ug
曲拉通 X-114pAc5.1/V5-His/LacZ2 ug
台盼蓝pAc5.1B-EGFP2 ug
胰蛋白酶 1:250pAcAd5 9.2-100 2 ug
胰蛋白酶抑制剂pAcAd5 CMV-GFP 2 ug
进口、国产缓冲MUG琼脂用于滤膜MUG法检测食品中大肠杆菌数(SN/T1059.2)Buffered MUG Agar100
进口、国产乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂用于滤膜MUG法检测食品中大肠菌群数(SN/T1059.2)LMG Agar250
进口、国产茜素-β-半乳糖苷琼脂用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T)Aliz-gal Agar250
进口、国产Tergitol-7 琼脂用于大肠菌群的鉴定(NMKL)Tergitol-7 Agar250
进口、国产TTC 溶液(0.125%)添加于HB0127中TTC Solution(0.125%)2ml*10
进口、国产标准I号营养琼脂标准细菌计数、含糖(MERCK方法)Standard I Nutrient Agar250
豇豆慢生根瘤菌图片MH肉汤(MHB) 250(g)
Antibiotic agar 1 GROVE and RANDALL medium 1 抗生素琼脂11号 1.05269.0500MERCK默克
Reinforced clostridial medium(RCM)梭状芽孢杆菌加强培养基 1.05411.0500MERCK默克
KLIGLER agar Double sugar iron agar acc.toKLIGLER KLIGLER 1.03913.0500MERCK默克
Nutrient agar营养琼脂 1.05450.0500MERCK默克
Standard count agar标准计数琼脂 1.01621.0500MERCK默克
PALCAM培养基基础 与PALCAM抗生素添加剂联用,分离培养食品中的李斯特菌500g