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产品介绍:
Taq DNA连接酶
描述:Taq DNA 连接酶是一种热稳定性连接酶,能够催化 磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相 邻寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯 键相连。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 配对,并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可 发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-65℃ 范 围内,Taq DNA 连接酶均有活性。该酶在 1XHiFi Taq Ligase Buffer 中具有的保真性连接。
组分
应用
双链 DNA 切刻的修复
储存:-20℃可保存半年,长期储存请置于 -70℃。
活性定义:1 单位指 50μl 反应体系中,45℃ 条件下,15 分钟内能使 50% 的 1μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段(12bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。该酶也可以使用 1×Taq DNA Ligase Buffer20 mM Tris-HCl(pH 7.6),25 mM KAc,10 mM Mg(Ac)2,10 mM DTT,1 mM NAD 和 0.1% Triton X-100,45℃ 温育。 该酶需 NAD+ 作辅因子,在 10×Taq DNA 连接酶缓冲液中已添加 NAD+;为了延长 NAD+ 的半衰期,缓冲液应于 -70℃ 贮存。
使用方法
1、配制如下反应体系
DNA up to 1 µg
10×HiFi Taq Ligase Buffer 5 µl
Taq DNA Ligase 2 µl
灭菌水 up to 50 µl
2、45℃孵育 15min。
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