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产品介绍：

HG TaqMan miRNA反转录试剂盒

描述： TaqMan miRNA 反转录试剂盒采用加 A 法进行反转录，加 A 法的反转录效率远高于茎环法，因 此，采用该方法可极大的提高检测灵敏度（原理见图 1）。 该试剂盒操作简单，仅需要两步即可轻松完成 miRNA 的 cDNA 合成，合成的 cDNA 可用于所有 miRNA 的后续定 量检测。反转录完毕后采用特异性的上游引物和接头引物 进行 PCR 扩增，FAM 标记 TaqMan 探针作为荧光报告基 团进行定量检测（原理见图 1）。  TaqMan miRNA 反转录试剂盒专用于 miRNAs 分子的反转录试验，转录获得的 cDNA 产物用于 TaqMan 定量 PCR 方法检测 miRNAs 分子

储存：请置于-20°C，可保存 2 年；避免反复冻融
操作方法
1 按以下组分在 0.2 ml EP 管中配制应液
miRNA （5～100 ng/μl） 4 μl
5×TaqMan miRNA RT Solution A 1 μl
注意：不建议使用 Total RNA，Total RNA 试验结果通常差
于 miRNA。
2 在 PCR 仪上按以下条件进行加 A 反应:
 37°C 30min
 85°C 5min
3 反应完毕后，在上述 5μl 反应体系中加入如下试剂，并
混合均匀。
10×TaqMan miRNA RT Primer 2 μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B 2 μl
H2O 11 μl
4 在 PCR 仪上按以下条件进行反转录反应:
 30°C 5min
55°C 60min
 95°C 5min
获得的 cDNA 产物可用于多个目标 miRNA 的检测。反转录完毕后获得的 miRNA cDNA，可加入 20~80μl ddH20 稀释2~5 倍，通常取 2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR试剂盒检测。

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