细胞周期同位素标记法测定原理
时间:2024-10-09 阅读:140
标记有丝分裂百分率法 (PLM) 是一种常用的测定细胞周期时间的方法。其原理是对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射自显影技术显示标记细胞,通过统计标记有丝分裂细胞百分数的办法来测定细胞周期。
测定原理:
① 待测细胞经 3H- 胸腺嘧啶核苷标记后,所有 S 期细胞均被标记。
② S 期细胞经 G2 期才进入 M 期,所以一段时间内 PLM = 0。
③ 开始出现标记 M 期细胞时,表示处于 S 期最后阶段的细胞,已渡过 G2 期,所以从 PLM = 0 到出现 PLM 的时间间隔为 G2期的持续时间。
④ S 期细胞逐渐进入 M 期,PLM 上升,到达到最高点的时候说明来自处于 S 最后阶段的细胞,已完成 M,进入 G1 期。所以从开始出现 M 到 PLM 达到最高点 (≈ 100%) 的时间间隔就是 M 期的持续时间。
⑤ 当 PLM 开始下降时,表明处于 S 期最初阶段的细胞也已进入 M 期,所以出现 LM 到 PLM 又开始下降的一段时间等于 S 期的持续时间。