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检测elisa试剂盒实验原理与步骤?

时间:2020-08-12      阅读:288

检测elisa试剂盒试验原理:

检测elisa试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知ALT浓度的标准品、未知浓度的样品加入微

孔酶标板内进行检测。先将ALT和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经

过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的

深浅和样品中ALT的浓度呈比例关系。

检测elisa试剂盒操作注意事项:

试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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