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进口elisa试剂盒PCR反应体系

时间:2017-01-18      阅读:589

进口elisa试剂盒临床基因扩增实验又称PCR实验,是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法,测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,因此被临床医生广为认可,已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。多聚酶链式反应的原理类似于DNA的天然复制过程。
在待扩增的DNA片段两侧
和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA扩增2n倍。
1.变性:加热使模板DNA在高温下(94℃)变性,双链间的氢键断裂而形成两条单链,即变性阶段。
2.退火:使溶液温度降至50-60℃,模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合,即退火阶段。
3.延伸:溶液反应温度升至72℃,耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板,在引物的引导下,利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸(dNTP),按5'→3'方向复制出互补DNA,即引物的延伸阶段。
进口elisa试剂盒上述3步为一个循环,即高温变性、低温退火、中温延伸3个阶段。从理论上讲,每经过一个循环,样本中的DNA量应该增加一倍,新形成的链又可成为新一轮循环的模板,经过25-30个循环后DNA可扩增106-109倍。典型的PCR反应体系由如下组分组成:DNA模板、反应缓冲液、dNTP、两个合成的DNA引物、耐热Tag聚合酶。
apo- 转铁蛋白        dNTP 和引物清除剂    100 次
D- 阿拉伯糖        dNTP 溶液 ( 标记 )    0.5mL
L- 阿拉伯糖        dNTP 溶液 ,10mM    0.5mL
L- 精氨酸盐酸盐        dNTP 溶液 ,10mM    5mL
L- 精氨酸        dNTP 溶液,100mM     0.5mL
抗坏血酸        dNTP 溶液,100mM     5mL
L- 天门冬酰胺        dNTP 溶液,2.5mM    0.5mL
L- 天门冬氨酸        dNTP 溶液,2.5mM    5mL
金精三羧酸        DOP-PCR 试剂盒    50 次
金胺 O        Doxorubicin(Adriamycin) 阿霉素    100μL
亲和素        DpnI    500U
8- 氮杂鸟嘌呤        DTT,蛋白    5g
杆菌肽        DTT,免称量蛋白    48 管
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