抗体贮存秘诀大公开
时间:2017-10-25 阅读:82
抗体由于性质和所运用的储存条件不同,其存储的“保质期”可能从几周到几年不等。尽管每个抗体存储的条件是一同的,但仍是可以总结出一些关于抗体存储建议和一般准则。
一:低温对抗体的保存至关重要
一般来说,抗体存放在≤4℃的清洁,灭菌的玻璃或塑料管。储存在室温下一般会由于微生物的生长导致抗体退化和/或失活。抗体储存液放在4℃环境中1天或许几周内其活性不会遭到明显影响。别的,抗体中可以参与终浓度为50%的甘油或乙二醇储存于-20℃。一般我们为了防止重复冻融,可以分装抗体。还可以参与抗微生物药物(如*或硫柳汞)以防止微生物的生长。带有符号的抗体一般可以在甘油或乙二醇中于-20℃保存1-2年。但是,在冷冻保护剂的污染物可能会影响酶的活性。
一些研究人员发现多克隆抗体在血清中于-20℃保存十年其活性丢掉不大。但是,一旦抗体被纯化后,储存在50%的甘油中于-20℃保存,即便没有冻融,其活性的丢掉也可以观察到,尽管其进程仍然非常缓慢。单克隆抗体可以用两种办法保存:*,保存在50%的甘油存放于-20℃;第二,也是比较好的办法,将其保存在丰满硫酸铵于4℃或-20℃(4℃更好)保存。在大多数情况下,冻干的抗体是存放在-20℃。
二:向抗体储存液中参与抗氧化剂是防止抗体因氧化失效的关键步骤
氧化反应是某些酶,尤其是巯基酶的一同问题。为了防止氧化反应对抗体的损坏,我们可以向抗体中参与一些还原剂(如二硫苏糖醇(DTT)或 巯基乙醇(2-ME))。实验证明:越高的pH环境和温度,有酶活性的抗体的保存时间越短。此外,参与0.1mM的铜离子,其氧化率添加;而参与金属螯合剂EDTA可添加有效期。
三:蛋白质安稳剂和抗生素对抗体的安稳储存发挥着重要作用
蛋白质安稳剂可以延伸大多数蛋白质在4℃或-20℃的保质期。而25-50%的甘油或乙二醇等防冻剂有助于安稳抗体,防止在-20℃环境中构成冰晶,防止其损坏蛋白质的结构。蛋白酶克制剂的参与可以防止抗体发生水解反应导致其失活。而抗微生物药物,如终究浓度在0.02-0.05%(W / V)的*(NaN3的)或终浓度为0.01%(W / V)的硫柳汞可以克制微生物的生长。