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重要事情说三遍:ELISA试剂盒操作的重要事项

时间:2017-10-10      阅读:56

ELISA试剂盒跟着我国市场和科研技术的快速老练,现在我国对酶联免疫吸附剖析办法研讨上的技术现已十分老练,现在由国内自主研制的elisa试剂盒和国外的elisa试剂盒在质量能够持平,做出来的数据现已到达相同的技术指标,由国内自主研制的酶联免疫吸附法elisa试剂盒现已成功了进口酶联免疫elisa试剂盒在我国市场的独占位置,甚至在未来的一两年内能够超越国外的elisa试剂盒的技术水平,这是国人的骄傲,更是我国科研人员的骄傲!
国内的的ELISA试剂盒质量现已很老练了,进口的东西仅仅消费者心理比较简单得到满意,其实用起来作用是差不多的,进口原装的elisa试剂盒的价格是国产elisa试剂盒的好几倍呢,国内的技术水平仍是比较*的,为什么不支持国产,我们国内的试剂盒出口的国外价格也很高,其实消费者就是买个心理安心买足,理智的消费者仍是会选择国产elisa试剂盒,这个我仅仅提个小小的意见,其实是差不多的。
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反响孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗刷缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗刷,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反响孔中,置37℃孵育1小时。然后洗刷。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反响孔中,参加新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗刷。
4. 加底物液显色:于各反响孔中参加暂时制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 停止反响:于各反响孔中参加2M硫酸0.05ml。
6. ELISA试剂盒成果断定:可于白色背景上,直接用肉眼调查成果:反响孔内色彩越深,阳性程度越强,阴性反响为无色或极浅,根据所呈色彩的深浅,以“+”、“-”号表明。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规则的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

 

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